环介导等温扩增技术快速检测肉中沙门氏菌的研究.pdfVIP

201l食品安全技术与标准国际研讨会暨AOAC中国区会议论文集 环介导等温扩增技术快速检测肉中沙门氏菌的研究 孟兆祥木1罗神1王润鑫2张伟2 1(中国检验检疫科学研究院，北京100029) 2(河北农业大学，保定071001) 摘要：本研究针对NCBI公布的沙门氏菌特异invA基因序列(GenBankEU348367)中的保守序列，使用在线软件 0．2)avl，内引物(FIP和BIP)各O．80M，环引物(LF和LB)各0．4p．M，2．0mmol／LMg+，1．6mmoi／LdNTP，2．5I．tLBst DNA BstDNA M PolymeraseBuffer,8Upolymerase，1．6Betaine，l肛模板DNA，灭菌双蒸水补足体系到25)al。扩增反 应条件：62℃水浴30min，再在80℃水浴锅中10min使酶灭活。扩增结束后，将产物在1．5％琼脂糖凝胶中进行电泳判 断检测结果。 本研究对12株常见致病菌分别进行LAMP反应来验证引物的特异性，结果表明：沙门氏菌