高原藏山羊藏山羊ISSR标记遗传多态性研究.pdfVIP

全国动物遗传育种及生物技术研讨会 高原藏山羊藏山羊lSSR标记遗传多态性研究宰 王杰1，王永1，许期树’，字向东’，欧阳熙’，刘鲁蜀1，小益西2 (1．西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室中国成都61004l； 2．西藏自治区农牧科学院拉萨850000) 摘 要：应用lssR标记研究西藏日十的高原型藏山羊遗传多样性。研究结果，所筛选出lo条引物 多态性较好，共扩增出清晰的条带112条，平均每条引物扩增出11．2条带，其中多态性条带75个，群 几率计算出多态性条带的基冈频率(f)，频率值的范围O．0455～1．0000。所获得的结果，揭示矾藏日 ．十的藏山羊遗传多态性较丰富，个体间存在差异，但又具有较好的一致性。 关键词：藏山羊：lssR；遗传多态性 中图分类号： 文献标识码：A 藏山羊世栖青藏高原，分为高原型和山谷型藏山羊两个生态类型IlJ。两藏日十县地处藏北高寒 lSSR(Inter 与砌飞P均对藏山羊的遗传多态性进行了研究。但尚朱』^!‘麻J}{j SequeIlceRepeat) Simple DNA) 标记，研究两藏日十县高原型藏山羊遗传多态性报道。ISSR标记技术是在SSR(Microsa仃llite 技术上发展起来的一种新型分子标记技术p·引。本研究从180多对引物中筛选出10对lSSR引物，对 两藏日土县的高原型藏山羊进行遗传多态性研究，谨报道于后。 1材料与方法 1．1供试羊只 在西藏日十县原种羊场，随机选择成年健康藏山羊(R．T)公羊46只、母羊61只，共计107只。 每只采集血样约lOmL，加抗凝剂，低温保存备用。 1．2实验方法 1．2．1基冈组DNA提取 定DNA的浓度和纯度后，再将DNA浓度稀释至20 n∥此，在．20℃条件_卜．保有备用。 1．2．2 PCR反应 从93条lSSR引物阳31中，筛选出10条引物，经上海基康生物公司合成引物序列，见表l。 Master 的琼脂糖凝胶中，电泳1．5～2h(电压3V／锄)，电泳结束，凝胶成像系统扫描记录。 1．3统计参数 在电泳图谱中每一条带记为一个位点，记录清晰可辨条带。扩增出现记为l，缺失记为0，建 遗传差异值(MAPD)118l，群体的多态位点百分率(p)和多态位点频率(D‘191。 ’项目来源：网川省心用堆础项日(2008JY0067．1)“商原型藏山羊产绒性状相关的功能摹冈研究”的部分内容。 作者简介：．‘￡杰(1940一)，男，教授，主要研究方向动物遗传育种。E·majl：嘲gii—ou@si尬．c0帅 94 全国动物遗传育种厘生物技术研讨会 表l lssR的引物序列 2结果与分析 21群体多态性 lO条IssR引物，在RT群体兆扩增山】】2个条带，平均每条0I物扩增山】l2条带，其中多态 96％，扩增的片段人小范隔219～2534bp，其中B9扩 性条带7s个，群体的多态位点百分宰(p)为66 0000(表1)。 条(均为多态性条带)。异条引物在RT群体内个体问扩增多态性比例范嗣04000～1 圈l引糟B9在盯十件的扩增结果 M：M砒d为mxl74-HacⅢd1弹l，卜ll为Il十牛H个体∞扩增“-* 22群体内相似性指数 5“7