胺甲基化聚丙烯酰胺阳离子交换剂合成与表征.pdfVIP

维普资讯 离子交换与吸附，2008，24(4)：354～360 IoNEXCHANGEAND ADSORPTIoN 文章编号：1001—5493(2008)04—0354—07 胺甲基化聚丙烯酰胺阳离子交换剂的合成与表征 张东文 李海涛料 徐满才 湖南师范大学化学化工学院，长沙 410081 摘要：采用反相悬浮聚合法合成2O％交联度的聚丙烯酰胺 (Polyacrylamide，PAM)树脂，经过 Marmich反应修饰 ac de：nformaldehyde：ndimethylamlne=1：1：1．2)得到高亲水性弱碱性阴离子交换 剂氨甲基化聚丙烯酰胺 (AminomethylatedPolyacrylamide，APAM)。随着修饰反应时间的增加， 得到的APAM 的弱碱交换量与蛋白质吸附量增加，在选定的实验条件下，确定 Mannich反应 时间以 1h为宜，所得树脂对牛血清白蛋白吸附量达到 433mg／g，过长的反应时间导致树脂结 构有一定程度的破坏。树脂对蛋白质的吸附等温线符合 Langmuir方程，实际分离牛血清白蛋 白和血红蛋白效果较好，柱体积不随洗脱液中盐浓度的增加而变化 关键词：聚丙烯酰胺；Mannich反应；阴离子交换剂；蛋白质分离 中图分类号：TQ425．3 文献标识码：A 1前 言 离子交换 (Ionexchange)是色谱分离蛋白质包括抗体和其它大的生物分子最常用的 方法[1 。离子交换剂上官能团与蛋 白质所带的相反电荷之间的静电引力使蛋白质能够保 留在固定相上，通过调节pH值、盐浓度等，利用不同蛋白质和离子交换剂之间结合能力 的不同实现分离。早期采用的离子交换剂以纤维素、葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶为载体[5’】， 但其耐酸、耐碱和抗微生物污染的能力较差，且较昂贵。目前，对离子交换固定相的研究 主要集中于高效液相色谱分离领域，蛋白质分离制备用商品化离子交换固定相并没有太大 发展 卅川。本研究采用反相悬浮聚合方法合成聚丙烯酰胺树脂，按下列路线使之功能基化， 转换成可用于蛋白质分离的弱碱性阴离子交换树脂。 — — — — CH2CH— — CH2CH— — H CH0 l l HN(CH3)2 OCONH2 OCONHCHaN(CH3)2 制备过程简单，得到的树脂具有很高的亲水性和蛋白质交换量，可应用于大量蛋白质的常 压分离，该研究未 关报道。 收稿 日期：2007年 8月i2日 作者简介：张东文(1982～)，男，安徽省人，硕士研究生． {通讯联系人 Email：pj~blht@yahoo．corn．an 维普资讯 第24卷第4期 离 子 交 换 与 吸 附 ·355· 2试验部分 2．1 试剂与仪器 石蜡 (长沙市分路 口化工厂)，正庚烷 (天津大茂化学试剂厂)，span一80(上海远航试剂 厂)，丙烯酰胺 (天津科密欧化学试剂有限公司)，N，N’一亚甲基双丙烯酰胺 (Acros)，过硫酸 胺 (天津福晨化学试剂厂)，四甲基乙二胺 (上海恒信化学试剂有限公司)，甲醛 (湖北大学 化工厂)，牛血清 白蛋白 (Sigma-Aldrich)，二甲胺，牛血清 白蛋 白 (BSA)，溶菌酶 (国药 集团化学试剂有限公司)。 RISE2008激光粒度分布仪 (济南润之科技有限公司)，NecoletNE