TSA—FISH在海洋超微型浮游植物研究上的应用.docVIP

ＴＳＡ－Ｆ ｌ  ＳＨ在海洋超微型浮游植物研究上的应用  吴文学黄邦钦 厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室、海洋与环境学院，厦门３６１００５  ＴＳＡ（Ｔｙｒａｍｉｄｅ  ｓｉｇｎａｌ  ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）信号放大技术自１９８９年诞生以来已经得到蓬勃 发展，其应用范围包括荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）、免疫 组织染色（ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＩＨＣ）等。ＴＳＡ技术具有大幅提升检测灵敏度、减少探针 使用量、避免使用放射性物质等优势。 ＴＳＡ—ＦＩＳＨ（Ｔｙｒａｍｉｄｅ ｓｉｇｎａｌ ａｍｐｌ ｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）是 一种新颖的高灵敏度的荧光原位杂交技术，它的主要反应原理是辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）催化 过氧化氢和标记的酪胺分子（ｔｙｒａｍｉｄｅ）的苯环部分反应，使荧光标记的酪胺分子在直接带 有或间接带有ＨＲＰ报告分子的探针周围沉积，信号因此得以极大的放大，从而大大提高了荧 光原位杂交技术的灵敏度。Ｓｃｈｒｉｍｌ等（１９９９）比较过传统ＦＩＳＨ与ＴＳＡ－ＦＩＳＨ之间的效果差异， 在都使用长度小于Ｉｋｂ的探针情况下，ＴＳＡ－ＦＩＳＨ可以清楚显示目标基因在细胞分裂中期染 色体中的位置，而传统ＦＩＳＨ则