b3大鼠脑组织内NF-κB活性及活化影响.pdfVIP

·660· 生堡塑堡匿堂皇壁星壁查!!!!芏!!旦箜!!鲞箜!!塑 ．基础研究 电刺激小脑顶核对缺血／再灌注大鼠脑组织内 NF—KB活性及其活化的影响 万东 罗勇 谢鹏 【摘要】 目的 观察Wistar大鼠局灶脑缺血／再灌注后，脑内核因子-KB(NF-KB)活性及其活化的基 本规律，并探讨电刺激小脑顶核(FNS)对其影响。方法成年雄性Wistar大鼠27只，随机分为正常组、单 纯局灶脑缺血／再灌注组(模型组)和局灶脑缺血／再灌注+电刺激小脑顶核治疗组(FNS治疗组)。采用线 栓法制备右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型，缺血时间均为2h，根据再灌注时间分为缺血2h／再灌注3，6， h。用 12和24h组。模型组不给予任何干预处理，FNS治疗组在缺血2h再灌注即刻给予FNS治疗1 Western blot法检测缺血脑组织核抽提物中NF．KB p65蛋白的表达，用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测 核抽提物中NF．KBDNA的结合活性。结果正常组大鼠脑组织核抽提物中有少量NF-KBp65蛋白，NF-KB DNA结合活性较弱。模型组再灌注各时间点，即再灌注3，6，12和24h，NF-KBp65蛋白含量均高于正常 组，其中再灌注6h和12h均显著高于正常组(P0．05)。模型组NF-KBp65蛋白含量变化趋势为：再灌注 3 h时 h再灌注6h再灌注12h，再灌注12h达峰值，各组间差异具有统计学意义(P0．05)；再灌注24 NF．KB DNA结合活性除再灌注3h外， p65蛋白含量明显低于再灌注6h和12h(P0．05)。模型组NF．KB 其余3个时间点均显著高于正常组(P0．05)；模型组再灌注3h时，NF—KBDNA结合活性明显弱于组内 其余3个时间点(P0．05)，这3个时间点均为高活性状态，组内差异无统计学意义(P0．05)。FNS治疗 h和12h时， 组NF．KB DNA结合活性的变化趋势与模型组相似。其中，再灌注6 p65蛋白含量及NF—KB h时，FNS治疗 FNS治疗组NF—KBp65蛋白含量明显低于模型组相应时间点(P0．05)；再灌注6，12和24 大鼠局灶脑缺血／再灌注后缺血 组NF．KBDNA结合活性也明显低于模型组相应时间点(P0．05)。结论 脑组织中NF—KB活化明显，活性增强；FNS可下调NF·KB活化程度，抑制NF-KBDNA结合活性，这可能是 FNS具有“抗炎”作用的重要机理之一。 电泳迁移率改变 【关键词】 电刺激小脑顶核；局灶脑缺血／再灌注；核因子一KB；DNA结合活性； 分析法 ontheactivationandthe ofnuclearfactor Theeffectsofelectrostimulationofthe nucleus KB fastigiaI activity aftercerebral WAN First ischemia-reperfusionDong，LUOYong，XIEPe