植物染色体标本制备的去壁、低渗法及其在细胞遗传学中的意义.pdfVIP

遗 传 学 报， 9(2)151-159,1982 ActaConeticaSinica 植物染色体标本制备的去壁、低渗法及其 在细胞遗传学中的意义，‘ 陈瑞阳 宋文芹 李秀兰 南（开大学生物系，天津） 本文主要对植物有丝分裂染色体标本制备的去壁、低渗法进行了研究。对37科105种植 物进行了大量的试验，在染色体计数、组型分析、Giemsa分带以及扫描电镜观察方面大部分取 得了较好的结果，表明这个方法在农作物、树木、果树、蔬菜染色体研究中具有一定意义。 作者对去壁、低渗法中的几个主要因素进行了分析和讨论。 近几年来，随着植物染色体研究的广泛开展，很多学者都试图将人类染色体标本制备 技术移植到植物材料上来．Gill等L9]在压片前应用纤维素酶和果胶酶对细胞壁进行解离。 最近法国A.Mouras2)等人iio［，在烟草愈伤组织、棒属和李属植物的根尖材料中，应用了酶解 和低渗液处理。Kurata和Omur沪1]在水稻染色体的研究中，也应用了酶解去壁和 KCI低 渗，取得了一定的进展。我们 自1979年也对植物染色体去壁、低渗、火焰干燥制备植物染 色体标本方法进行了研究2tl。两年多来，我们应用这个方法在植物染色体核型分析DIM Giemsa分带[a［7和扫描电镜观察方面进行了研究。本文是关于这个方法的总结报告。 材 料 和 方 法 我们对37科105种植物 包（括372个品种）进行了试验，其中旅类植物2种，裸子植物 4种，被子植物99种。大部分材料为广东、云南、吉林省农科院提供，部分材料是在本系 实验地种植和野外采集得到。去壁、低渗、火焰干燥制备植物染色体标本的具体方法，如 前报山，其简要流程如下： 材料培养 杏 前处理：0.002M8-羚基嚎琳的 y 0.01-0.2％秋水仙溶液 前低渗：0.075M KCI溶液 杏 去 壁：2.5％混合酶液 杏 本文于 1981年5月29q收到。 1)本研究承蒙东北师范大学郝水教授，武汉大学杨弘远 AP.wtnJ*w尔北帅泡大字9水教授，武汉大学杨弘远、周嫦副教授，本校张自立、昊小航、周之杭、胡志衡等副教 授多方指导和帮助丁扫描电镜系由华南农学院电镜室杨秉耀老师协助泊照，特此致谢。 1980年 5月我们 才 ni.i-iIIelf:该立。 152 遗 传 学 报 9卷 植物染色体 Giemsa分带方法：按 BSG法、HSG法和 N-带法处理E1,410 扫描电镜染色体标本的制备：用上述方法制备的染色体标本，Giemsa染色后，首先 在光学显微镜下挑选染色体分散好的细胞，作上标记，再按照扫描电镜样品台大小，将载 片切割开，喷金 （100-200入）后，用JSM--25S型扫描电镜观察拍照，电压2.5--12KV, 标本倾斜角为15-25度。 结 果 与 讨 论 使用低渗、火焰干燥法制备染色体标本的优越性，五十年代早已在人类及哺乳动物上 得到证明。我们将这种方法移植到植物材料上来，经过对37科105种植物的试验，结果 表明，除旅类和裸子植物未能取得很好的结果外，其它大部分被试材料都取得了良好的结 果 详（见表1)。因此我们认为，用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁去除后，再按当前哺乳 动物上通常使用的低渗、火焰千燥法制备植物染色体标本，即去壁、低渗、火焰干燥法，在 植物染色体研究中，同样具有重要意义。它比压片法具有若干优点，是当前植物染色体研 究中的一个重要方法。在植物染色体计数、组型分析、Giemsa分带以及扫描电镜观察方 面都取得了较好