病源真菌分离鉴定.docVIP

青岛农业大学 兽医微生物学课程论文 题 目： 病源真菌的分离鉴定 姓 名： 学 院： 动物科技学院 班 级： 马业科学1201 学 号： 任课教师： 温建新 二0一四 年 四 月 十二 日  病源真菌的分离鉴定 马业科学1201 任课教师 温建新 摘要：真菌在自然界分布广泛、数量大、种类多。有些真菌可以骑人和家畜疾病，有些真菌和可以生产毒素，直接或间接的威危害人类和动物的健康。了解真菌的培养方法，认识其形态十分重要。 关键词：酵母菌 根霉 培养基 引言：真菌中的酵母菌是单细胞微生物，细胞核和细胞质有明显的分化，个体直径比细菌大10倍左右，多为圆形或卵形。酵母菌无性繁殖主要是出芽繁殖，在特殊的情况下能形成假菌丝，有性繁殖是通过结合产生子囊孢子。用美蓝染色液制成水浸片，不仅可以观察其外形，还可以区分死活细胞。 霉菌的菌丝较大，细胞以收缩变形，且孢子容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成霉菌标本片的特点是：细胞不易变形，就有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保存较长时间，溶液本身呈蓝色，就有一定的染色效果。  目录 摘要 I 关键词 I 引言 I 1 材料 1 1.1 菌种 1 1.2 培养基及试剂 1 1.3 实验器材 1 2 方法 1 2.1 观察真菌在固体培养基上的生长状况 1 2.1.1 观察酵母菌固体培养基上的生长状况 1 2.2.1 观察霉菌固体培养基上的生长状况 1 2.2 小培养的制作 1 2.3 水浸片的制作 1 2.3.1 酵母菌水浸片的制作 1 2.3.2 霉菌水浸片的制作 1 3 结果观察 1 3.1 真菌在固体培养基上的生长表现 1 3.1.1 酵母菌在固体培养基上的生长表现 1 3.1.2 霉菌在固体培养基上的生长表现 2 3.2 小培养及水浸片的观察 2 3.2.1 酵母菌的形态 2 3.2.2 青霉的形态 3 3.2.3 根霉的形态 3 4 结论 3 参考文献 3 1 材料 1.1菌种 待测菌A、B、D悬液各一支 1.2 培养基及试剂 PDA培养基、美蓝染色液 1.3 实验器材 解剖针、玻片、盖玻片和接种环 2 方法 2.1 观察真菌在固体培养基上的生长状况 2.1.1观察酵母菌在固体培养基上的生长状况 将酵母菌在固体培养基上培养2-5d，可见霉菌菌落在培养基上的生长状况。 2.1.2观察霉菌在固体培养基上的生长状况 将不同霉菌在固体培养基上培养2-5d，可见霉菌菌落在培养基上的生长状况。 2.2 小培养的制作 玻片培养又称小培养，小培养法可以随时观察A、B、D的生长形态（如大分生孢子、小分生孢子及分生柄等），还可以随时观察其生长发育的全部情况，有利于菌种A、B、D的鉴定，将待测菌A、B、D接种在培养基，然后接种菌在载玻片上，加盖盖玻片，然后放入湿盒内3-5天。 2.3 水浸片的制作 2.3.1 酵母菌水浸片的制备 将美蓝染色液或蒸馏水滴于干净的载玻片中央，用接种环以无菌操作培养48小时的酵母菌体少许，均匀的涂于滴液中，染色2-3min后加盖盖玻片。注意切勿产生气泡，然后低倍镜和高倍镜观察其细胞形态、芽殖方式。注意酵母菌的形态、大小和芽体，同时可以根据是否染上颜色来区分死、活细胞。 2.3.2 霉菌水浸片的制备 在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液或蒸馏水，用解剖针从生长有霉菌的平板中挑取少量带有孢子的霉菌菌丝，用50％ [1] 李一经，兽医微生物学，2011年1月第一版。 [2] 陆承平，兽医微生物学第四版。 [3] 兽医微生物学(原书第2版） I 1 1