新Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1和3D编码基因的原核表达及抗3D蛋白单克隆抗体的制备.pdf

摘要 摘要 viral virus， 鸭病毒性肝炎(duckhepatitis，DVH)是一种由鸭肝炎病毒(duckhepatitis DHV)弓I起的急性、高度致死性传播迅速的传染病，病死率高达100％，是鸭的五大传染病 之一，对养鸭业造成严重危害。自从1945年在美国首次发现该病，其后世界多数国家相继 N株的编码结构蛋白的VPl基因和编码非结构蛋白的3D基因进行原核表达，并通过 Western-blot检测其免疫活性，再利用纯化后的重组原核表达蛋白3D作为免疫原免疫小鼠， 经过细胞融合，阳性筛选，杂交瘤细胞克隆化等步骤，成功制备l株抗DHV-1C的3D蛋 的快速诊断方法奠定了基础，并同时建立用于筛选的间接ELISA方法。 根据DHV-1C全基因序列，应用Primer5．0分析软件设计合成了扩增DHV-ICN毒株 的VPI和3D基因的两对引物，在VPI基因引物中加入BamHI和XholI酶切位点，在 3D引物中加入BamHI和Hind III酶切位点