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卷 期
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年 月 日
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!型分泌系统菌体表面展示!# 大肠杆菌黏附素及其
受体结合位点的确定
原志伟,蒋 颖,王建业,朱国强
(扬州大学兽医学院 扬州 ##3$$’ )
摘 要:自主转运蛋白( 型分泌系统)的 结构域已被证明可以将异源性多肽展示在细菌表面。运用 重组技
G ! HI)
术优化构建G 型分泌系统J,KL 并在菌体表面展示40 大肠杆菌黏附素4/D4 及其受体结合域4/D4。含重组质粒
或 大肠杆菌( ) 经厌氧诱导后,分别与兔抗 菌毛 亚单位单因子
*E,+MJ,KL2N/D4 *E,+MJ,KL2N/D4 ! B #$% HO3 405P 4/D4
血清和40 大肠杆菌黏附素受体易感性仔猪的小肠上皮细胞做玻板凝集试验和体外黏附试验,结果表明上述两株
诱导表达重组菌与 抗血清发生明显的凝集反应,且能较好地黏附于 大肠杆菌黏附素受体易感性仔猪小肠
4/D4 40
上皮细胞。而菌体表面展示 大肠杆菌黏附素 突变体 ()(黏附素受体结合域第 和 位组氨酸残
40 4/D4 4/D4 J 00 0’
基双突变为丙氨酸)的重组菌则失去上述凝集和黏附特性。以上试验结果说明, 大肠杆菌黏附素 及其受
40 4/D4
体结合域 在大肠杆菌表面得到了功能性表达,并进一步证明了位于 受体结合域内第 和 位组氨酸
4/D4 4/D4 00 0’
残基对4/D4 受体结合域的形成至关重要。
关键词: 型分泌系统;自主转运蛋白;菌体表面展示; 受体结合域
G 4/D4
中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( )
Q’%’ R’ ) $$$21#$’ #$$ $#2$%’2$3
G 型分泌系统又称自主转运蛋白分泌系统,是 具,我们运用肠道沙门氏菌自主转运蛋白J,KL 的!
革兰氏阴性菌 种蛋白分泌系统中最为简单的一 结构域成功地将 菌毛黏附素 及其受体
3
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