PCV2衣壳蛋白羧基端基因在T4噬菌体表面的展示及ELISA方法的建立.pdfVIP

中国兽医学报 年 月 第 卷 第 期 ２０１１ ８ ３１ ８ ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉ Ａｕ ．２０１１ Ｖｏｌ．３１ Ｎｏ．８ １１０３ 　 　 　 　 　 　　 　 　 ｇ 　 　 　 衣壳蛋白羧基端基因在 噬菌体表面的展示及 方法的建立 ＰＣＶ２ Ｔ４ ＥＬＩＳＡ ， １ ２ １ １ １ １ ， ， ， ， （ ， ； 王宪文 曹永长 马静云 谢青梅 毕英佐 华南农业大学动物科学院 广东广州 河南科技 １． ５１０６４２ ２． 　　 　 ， ） 学院动物科学院 河南新乡 ４５３００３ ： ， ， 摘要 用ＰＣＲ扩增猪圆环病毒 型广东分离株的衣壳蛋白羧基端基因 将 ＰＣＲ产物连接到 Ｒ 质粒 转化 ＤＨ５ Ⅱ ｐ α ， ， ， ， 细胞 筛选阳性克隆进行 鉴定并测序后 转化 菌 将重组 菌与缺陷型噬菌体 同源重组后 得到重 ＰＣＲ Ｅ２ Ｅ２ Ｔ４Ｚ１ － ， ， ， 组噬菌体 经ＳＤＳＰＡＧＥ和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎ 分析 表明衣壳蛋白片段在噬菌体表面正确展示 表达的融合蛋白的 － 　 ｇ 。 ， ， ， 分子质量约为 ２５ｋｕ 用差速离心法纯化重组噬菌体 将纯化噬菌体作为包被抗原 建立了 ＥＬＩＳＡ诊断方法 经对 ， ， ， 份临床发病猪血清样品检测 结果表明仔猪的血清阳性率为 育肥猪的血清阳性率为 种猪的血 ３５６ ３４．８％ ５７．８％ 清阳性率为６７．９％。 ： ； ； 关键词 猪圆环病毒 型 衣壳蛋白 展示 Ⅱ 中图分类号： 文献标志码： 文章编号： （ ） Ｓ８５２．６５ Ａ １００５４５４５２０１１０８１１０３０４ 　　　 　　　 － － － ＴｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＥＬＩＳＡａｓｓａ ｗｉｔｈｔｈｅ ｕｒｉｆｉｌｄｒｅｃｏｍｂｉｎｅｄＴ