ATRA调节血管平滑肌细胞中KLF4表达的分子机制.pdf

Y1 90056iji。 目 录 中文摘要……………………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………………4 研究论文ArRA调节血管平滑肌细胞中ⅪJ4表达的分子机制 前言…………………………………………………………………………………………………8 刖舌………………………………………………………………………………………………………………………6 材料与方法……………………………………………………………………8 结果…………………………………………………………………………·14 附图………，．．…………………………………………………………………17 讨论……………………………………………………………………………25 结论……………………………………………………………………………………………·28 参考文献……………………………………………………………………-28 1 综述关于Ⅺ。F4基因表达调控研究进展……………………………………·3 致谢…………………………………………………………………………………43 个人简历…………………………………………………………………………44 中文摘要 ATI认调节血管平滑肌细胞中KLF4表达的分子机制 摘 要 retinoic 目的：维生素A的衍生物全反式维甲酸(a11．transaCid，A1飞A) 在多种细胞中具有调节细胞生长和诱导分化的作用。维甲酸受体(retinoic acid 种亚型。该类受体通过与其相应的配体ATRA相结合，激活或抑制多种 基因的表达，从而在细胞增殖、分化及凋亡过程中发挥重要的作用。 Kmppel样因子4(km】ppel．1ike smoommuscle 的核转录因子，对血管平滑肌细胞(vascular cell，VSMC) 具有抑制增殖、诱导分化的作用。 的表达，但目前An认诱导KLF4表达的分子机制尚不清楚。本研究探 讨ATRA激活ⅪJ4基因表达的机制，研究№及相关的信号通路在 的分子基础。 方法：用贴块法分离、培养大鼠VSMC，胰蛋白酶消化传代，取3～ 5代细胞进行实验。Wbstem 的影响，应用不同信号通路抑制剂研究介导KLF4表达的信号转导途径。 结果： l ATRA诱导KLF4和RARa表达 O、6、12、24 以lO州ATRA刺激VSMCh后，提取细胞总蛋白和 RNA，分别进行Wbstem 激时间的延长，KLF4的表达水平呈时间依赖性升高，同时№表达水 平亦显著增高，提示RAR仅可能参与ATRA诱导Ⅺ』4的表达。 2 RARn介导ATRA诱导的KLF4表达 应用№拮抗剂Ro 1h后，ATRA 41．5253(20州)预处理VSMC 24 (10洲)刺激VSMCh，分别提取细胞总蛋白和砌妊，进行Wrestem 中文摘要 0【表达后，检测KLF4的表达变化。结果显示， VSMC，阻断内源性RAR 表达的诱导作用被抑制，表明凡恹0【介导—帆A对KLF4表达的诱导作用。 3