NGF对单眼剥夺大鼠视觉中枢nNOS阳性神经元数量及形态的影响.pdf

中 文 摘 要 NGF对单眼剥夺大鼠视觉中枢nNOS阳性神经元 数量及形态的影响 摘 要 目的:研究和探讨在大鼠视觉发育敏感期内神经生长因 子 (NGF)对单眼剥夺大鼠视觉中枢神经型一氧化氮合酶 (nNOS)阳性神经元数量及形态的影响，为临床预防和治 疗弱视拓展思路并提供基础研究依据。 方法 1.14日龄健康雄性SD大鼠64只，随机分成8组。于 生后 14日在乙醚吸入麻醉下进行左侧眼睑缝合，制成单眼 剥夺模型。其中正常组 1(N1)6只，单纯单眼剥夺组 1 (MD1)6只，单眼剥夺侧脑室插管注射神经生长因子组 1 (MD+NGF)110只，单眼剥夺侧脑室插管注射生理盐水组1 (MD+NS)110只，(MD+NGF)1组与(MD+NS)1组于14日龄 进行右侧侧脑室插管，四组均于28日龄处死。正常组2(N2) 6只，单纯单眼剥夺组2(MD2)6只，单眼剥夺侧脑室插管 注射神经生长因子组2(MD十NGF)210只，单眼剥夺侧脑室 插管注射生理盐水组2(MD+NS)210只，(MD+NGF)2组与 (MD十NS)2组于28日龄进行右侧侧脑室插管，四组均于42 日龄处死。插管动物均于插管即日起分别给予生理盐水、神 经生长因子注射。并于两周后处死，灌注固定。 2.采用免疫组织化学SABC技术染色和计算机图象分析 中 文 摘 要 处理系统，观察视觉发育敏感期内不同日龄 (28日龄和42 日龄)正常大鼠[Nl,N2]、单纯单眼剥夺大鼠[MD1,MD2], 单眼剥夺并侧脑室插管注射神经生长因子大鼠【(MD+NGF) 1,(MD+NGF)21、单眼剥夺并侧脑室插管注射生理盐水大 鼠[(MD+NS)1,(MD+NS)21nNOS阳性神经元在外侧膝 状体背核 (dLNG)、视皮质17区数量与形态的变化。 3.应用 SPSS12.o版软件包对结果进行统计学分析处 理 。 结果 1.光镜观察结果 参照 17区皮层尼氏染色结果观察，28日龄Nl组和 (MD+NGF)1组nNOS阳性神经元在大脑皮质枕叶17区 11-vi层均有散在分布，其中以11/111层和V/VI层为多;在 形态上，属于中间神经元，大多为非锥体神经元，也有少量锥 体神经元。多呈圆形、卵圆形、梭形和三角形，胞体较大， 突起明显，有的突起延伸很长且反复分支，免疫组化反应使 胞质和突起呈棕褐色，胞核不着色，核仁清晰可见。MDl 组和 (MD+NS)1组nNOS阳性神经元在大脑皮质枕叶17 区在分布与形态上和正常组相似，但染色淡，胞体小，树突 长度较短，且密度降低。42日龄各组nNOS阳性神经元在大 脑皮质枕叶17区分布及形态与28日龄处死组相似，但胞体 较小，树突分支减少。胞体和突起染色较淡，呈棕色，核仁 清晰。N2组神经元胞体面积较 MD2,(MD+NGF)2, (MD十NS)2三组大;但数密度和树突长度上比较差别不明 显。 28日龄Nl组和 (MD+NGF)1组nNOS阳性神经元在 z 中 文 摘 要 外侧膝状体背核呈散在分布，细胞为圆形、梭形和双极形， 淡至中等染色，着色主要在胞浆及细胞突起部分，胞核无着 色。细胞无轴突，有少量树突，且分支较少。MDl组和 (MD+NS)1组nNOS阳性神经元数密度降低，染色较淡。 42日龄各组nNOS阳性神经元在外侧膝状体背核呈散在分 布，形态与28日龄处死组相近，数量较少，染色较淡。N2 组较MD2,(MD+NGF)2,(MD+NS)2三组数密度大。 2.计算机图像分析结果 大脑皮质枕叶17区各层28日龄N1组和 (MD+NGF)1 组nNOS阳性神经元，两者在细胞密度、胞体截面积及树突 总长度上比较无显著性差异(P-}:0.05).MD1组和(MD+NS) 1组间在上述部位的比较，差别亦不显著 (P30.05)。但N1 组和 (MD+NGF)1组与MD1组和 (MD+NS)1组分别比 较时除皮质N层外各部位在细胞密度、胞体截面积及树突总 长