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高效液相色谱在口腔医学中的应用 院 系： 专 业： 学生姓名： 学 号： 二〇一 年 月 日  摘 要 高效液相色谱技术( high performance liquid chromatography, HPLC )是一项分离、分析技术，具有分离效率高、灵敏度高、分析速度快、应用范围广、色谱柱可重复使用、样品不受热不稳定的限制等特点，适应于口腔医学“标本数量少、成分含量低”的特点，因此被越来越广泛地应用于口腔医学领域。本文简要地介绍了HPLC，并着重阐述了其在口腔医学领域的应用现状。 关键词：高效液相色谱；口腔医学；检测分析  目录 引言 1 1 HPLC简介 1 1.1 HPLC的原理及组成 1 1.2 HPLC的分类 1 2 HPLC在口腔医学研究中的应用 2 2.1 口腔疾病相关物质方面 2 2.2 口腔微生物方面 3 2.3 口腔临床药物方面 3 结语 4 参考文献 5 引言 高效液相色谱技术( high performance liquid chromatography, HPLC )是上世纪60年代末出现的一种分离、分析技术。适宜于挥发性低、分子量大的化合物或离子型化合物。因其具有分离效率高、灵敏度高、分析速度快、应用范围广、色谱柱可重复使用、样品不受热不稳定的限制、流动相可选范围宽及分析结果受环境影响小等特点，目前已成为应用广泛的分析方法。由于口腔标本数量少, 成分含量低, 非常适宜于HPLC技术分析，因此近年来HPLC技术在口腔医学的研究领域应用也越来越广泛[1-3]。 HPLC简介 HPLC的原理及组成 高效液相色谱（HPLC）是以溶剂液体为流动相、以“相似相溶”原则为基础、利用固定液与被分离分子之间的特殊作用力来达到分离目的的色谱方法。在其分析、分离过程中，溶质样品在固定相和流动相之间进行连续多次的交换，并借溶质在两相间的亲和力、分配系数、吸附能力、离子交换或分子大小不同而引起的差速迁移来实现不同溶质间的相互分离[1]。 高效液相色谱仪由四大部分组成：高压输液装置、进样系统、分离系统（色谱柱）以及检测系统。其中，分离系统（色谱柱）是HPLC仪器的关键组分，其内可根据不同的分离原理装填不同的柱填料，对样品的分离效果起到决定性的作用，其好坏是实验成功与否的关键[1,3]。 HPLC的分类 HPLC可以根据不同的分离原理（使用不同的固定相载体）可以分为以下5类：（1）分配色谱；（2）吸附色谱；（3）离子交换色谱；（4）尺寸排阻色谱（又称凝胶色谱）；（5）亲和色谱。 另外，HPLC的流动相为溶剂，它既有运载作用，又与其固定相一样，参与对分离组分的竞争。因此，还可以根据其流动相的区别分为两大类：（1）正向色谱（流动相极性小于固定相极性，适于极性组分的分离）；（2）反相色谱（流动相极性大于固定相极性，适于非极性组分的分离）。 HPLC在口腔医学研究中的应用 高效液相色谱（HPLC）因其具有分离效率高、灵敏度高、分析速度快、应用范围广、色谱柱可重复使用、样品不受热不稳定的限制、流动相可选范围宽及分析结果受环境影响小等特点，适用于“口腔标本数量少, 成分含量低”口腔医学领域的研究分析,因此近年来HPLC技术在口腔医学的研究领域应用越来越广泛。下文将从口腔疾病相关物质、口腔微生物、口腔临床药物3个方面对HPLC技术在口腔医学领域中的应用现状进行综述。 口腔疾病相关物质方面 儿童龋坏的发生与其承受的心理压力有无关系一直是人们争论的问题。Vanderas等采用HPLC技术测定尿中儿茶酚胺（心理压力的评价指标）的含量，结果发现：尿中儿茶酚胺含量高的儿童其患龋率明显升高[3]。 王锋等采用HPLC对正畸拔除的健康双尖牙牙髓组织中儿茶酚胺进行定量研究，结果表明正常牙髓组织中去甲肾上腺素含量为23.47μg/g，多巴胺含量为19.17±1.03μg/L，未检测出肾上腺素水平。 唾液获得性膜是唾液蛋白选择性吸附于牙面形成的。Lamkia等采用HPLC纯化唾液蛋白后，对唾液蛋白对牙面吸附的时间和组成特征进行研究，结果显示唾液蛋白对牙面羟磷灰石具有不同的吸附过程，提示两个可能的机制是直接吸附或通过与已吸附于牙面的其它蛋白相互作用而产生的间接吸附[2]。 白介素-1（IL-1）和白介素-4（IL-4）均是人类重要的炎症介质。Cotti等采用HPLC定量分析了IL-4在牙根根尖损伤中的作用，发现在感染牙髓组织中，IL-4的浓度明显高于未感染牙髓，但其浓度与临床症状无关。而Wang等对IL-1的HPLC分析表明：I