生物技术在害虫防治中应用概况.pptVIP

* * 第三章 生物技术在害虫防治中的应用概况 第一节 转基因抗虫育种 第二节 微生物杀虫剂 二、抗虫基因的来源 一、转基因抗虫育种的发展概况 第一节 转基因抗虫育种 一、转基因抗虫育种的发展概况 转基因抗虫育种的优点 1.打破种属间难杂交的界限；2.成本低；3.保护作用遍及全株 ；4.不污染环境，相对安全；5.不杀伤天敌。 一、转基因抗虫育种的发展概况 转基因抗虫育种的研究概况 1987:获得第一株抗虫转基因烟草; (番茄、马铃薯、棉花、玉米、水稻、杨树) 1995年后陆续开始了商业化生产 二、抗虫基因的来源 植物：蛋白酶抑制剂；а-淀粉酶抑制剂及一些 次生代谢物 细菌：细菌毒素，如苏云金杆菌的δ－内毒素 真菌：真菌毒素 病毒：昆虫杆状病毒、昆虫多角体病毒等 昆虫：神经肽（蝎毒素、蜘蛛毒素）、昆虫性激 素、昆虫保幼激素及酯酶等 。 第二节 微生物杀虫剂 目前已发现的病原微生物有1000种以上，其中主要是病毒、细菌、真菌、线虫、立克次体等。 二、细菌杀虫剂 一、病毒杀虫剂 三、真菌杀虫剂 一、病毒杀虫剂 昆虫病毒的主要类群 昆虫病毒的生产 昆虫病毒防治害虫的特点 昆虫病毒的遗传重组 （一）昆虫病毒的主要类群 目前我国已知寄生昆虫和蜱螨类的病毒有200多种，分包涵体病毒和非包涵体病毒两类。根据包涵体的形状及病毒粒子在细胞中增殖的部位不同，包涵体病毒又可分为核型多角体病毒、质型多角体病毒及颗粒体病毒3种。 包涵体是病毒在宿主细胞内形成的一种结晶蛋白，在光镜下呈多角形，又称多角体 。功能是保护病毒粒子免受不良环境的破坏。 （一）昆虫病毒的主要类群 1.核型多角体病毒（Nuclear Polyhedrosis Virus,NPV) NPV是环状dsDNA病毒，病毒粒子为杆状，包埋在多角体的包涵体中，一般感染昆虫的幼虫。其寄主范围十分专一。 通过取食感染，幼虫感病后行动迟缓，食欲减少，最后腹足紧抓寄主植物枝稍，倒悬而死。死后组织液化，表皮轻触即破，流出脓状体液，但无臭味。 （一）昆虫病毒的主要类群 2.质型多角体病毒 （Cytoplasmic polyhedrosis virus, CPV） 属呼肠孤病毒科，质型多角体病毒属，多角体一般为四边形、六边形等。病毒粒子为球状正二十面体，具蛋白质包涵体，在宿主细胞质内增殖，病毒核酸为RNA。 目前应用较多的有松毛虫质型多角体病毒，感染CPV的松毛虫幼虫，前期病症不明显，随后幼虫食欲减退，生长发育缓慢，体型萎缩，头大尾尖，刚毛竖起，尾部常带有灰(黄）白色的粘稠粪便，虫子死后不易触破。 （一）昆虫病毒的主要类群 3.颗粒体病毒（Granulosis virus，GV） GV也属于杆状病毒科，只侵染鳞翅目昆虫，颗粒体病毒的包涵体称为颗粒体，病毒核酸为DNA ，颗粒体在被感染细胞的核内形成，核膜破裂后可溢到细胞质内。颗粒体病毒粒子也是杆状，一般一个包涵体内只有一个病毒粒子。 侵染途径： 口服 中肠中溶解 肠道柱形细胞的微茸毛侵入 细胞核中增殖 释放于血淋巴中 （二）昆虫病毒的生产 昆虫病毒只能在活的寄主体内或或细胞中增殖 基本生产工艺如下： 感病虫尸机械磨浆过滤 离心提纯 干燥 粉碎过筛 标定含量 添加助剂拌合 分装 （三）昆虫病毒防治害虫的特点 利用昆虫病毒防治害虫有如下优点： 对寄主昆虫有高度的毒性和致病性，害虫极少或 不产生抗性。 能形成保护性包涵体，不易丧失活性。 寄主范围仅限于无脊椎动物，对人、畜安全。 自然条件下易引起害虫群体病毒病流行，可控制 当代和子代的种群数量。 不足:杀死害虫时间长，杀虫谱窄及不易大规模生产。 （四）昆虫病毒的遗传重组 目前对昆虫病毒的基因工程改造主要集中于杆状病毒，因其基因组较大，插入外援基因的容量较大，同时，外源基因的表达水平高，表达产物可正常糖基化，具有与天然蛋白相似的抗原性和功能。因此，杆状病毒的基因工程改造成为研究的一个热点。 研究的内容主要集中于以下3个方面： 引入外源蛋白、引入基因、修饰或加工 二、细菌杀虫剂 苏云金杆菌杀虫剂 其它抗虫细菌 昆虫病原细菌已知有90多种，主要分布在芽孢杆菌属、假单胞杆菌属等几个属。其中芽孢杆菌中苏云金杆菌和日本金龟子芽孢杆菌应用较多。 （一）苏云金杆菌杀虫剂 1.苏云金杆菌（Bacillus