拟南芥FATB蛋白的亚细胞定位.pdfVIP

每 北难 业 学报 2O13，22(11)：163—167 ActaAgriculturaeBoreali—occidentalisSinica doi：10．7606／j．issn．1004—1389．2013．11．029 网络出版时间：2013—11—22 网络 出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／61．1220．S1048．003．html 拟南芥FATB蛋 白的亚细胞定位 蒋 琦，孙建丽，徐 虹，赵惠贤，王 倩 (西北农林科技大学 生命科学学院；旱区作物逆境生物学国家重点实验室，陕西杨凌 712100) 摘 要 为研究拟南芥 中脂酰基一ACP硫酯酶 B(FATB)的亚细胞定位 ，采用 RT—PCR方法克隆FATB基 因 的全长 cDNA，构建其与 eGFP基因融合的表达载体 pUC—FATB-eGFP—NOS，分离拟南芥叶肉细胞原生质体， 然后将 pUC—FATB-eGFP—NOS转入拟南芥叶肉细胞原生质体中表达 ，最后在荧光显微镜下检测到 eGFP荧 光信号定位于叶绿体上。 关键词 FATB；亚细胞定位 ；eGFP；拟南芥 中图分类号 S532 文献标志码 A 文章编号 1004-1389(2O13)11-0163—05 SubcellularLocalizationofArabidopsisFATB Protein JIANG Qi，SUNJianli，XU Hong，ZHAO HuixianandWANG Qian (CollegeofLifeSciences．NorthwestA＆FUniversity．StateKeyLaboratoryofCropStressBiology forAridAreas，YanglingShaanxi 712100，China) Abstract InordertoexaminethesubcellularlocalizationoffattyaeylthioesteraseB (FATB)，afull— length cDNA ofFATB genewasclonedfrom Arabidopsisthaliana byRT—PCR．W emadethecon— structfusedwitheGFPintransientexpressionvectorpUC—FATB—eGFP—NOS，transformedabovevec— torintoArabidopsis1eafprotoplastanddetectedfluorescencesignalsunderfluorescencemicroscope． TheresultsshowedthatFATB：eGFP fusionproteinlocalizedinchloroplast． Keywords FATB；Subcellular1ocalization；eGFP；Arabidopsisthaliana 脂肪酸是所有植物细胞的必需组分 ，也是能 根据底物偏好性将拟南芥 FAT分为 FATA 量储存 的基础 ，并作为激素和其他重要生物分子 和 FATB2个家族 [1。体外酶活试验结果表明， 合成的中间体_】]。研究表 明，多种脂类 的含量变 FATA对不饱和脂肪酸 18：1-ACP的催化活性 化影响细胞器 的形态与功能[2。]，植物质体 中，在 最高 ，对 C16：0-ACP、C16：1-ACP和 18：0一 脂酰基载体蛋 白复合物 (Acylcarrierprotein， ACP的催化活性分别为 18：1-ACP催化活性 的 ACP)上经缩合脱羧、羰基还原、羟基脱水、双键还 1．6 、9．4 和 11．8 ；而 FATB对饱和脂肪酸 原四步反应生成脂肪酸 ，每 1个循环链长增加 2 16：0-ACP催化活性最高 ，另外对 C16：1一ACP、 个碳原子，直到合成 C16：0(棕榈酸)或 C18：0 18：0