细菌内毒素检测方法验证方案定稿.docVIP

细菌内毒素检测方法验证方案 起草人： 部门 姓名 签名 日期 QC 朱雪 审核人： 部门 姓名 签名 日期 批准人： 部门 姓名 签名 日期 生效日期： 文件分发范围：QA、QC 1.验证目的： 为确保细菌内毒素检测方法的专属性、灵敏度，保证检测结果可符合质量标准要求，特制定此验证方案。 2.验证范围： 适用于注射液细菌内毒素检测方法验证。 3.验证小组成员及职责： 组长：，QC经理，负责协调小组的行动，跟进验证方案的审批流程，协调与其他部门及小组成员内的交流，组织验证数据并文件化。 组员：，QC人员，负责起草方案并按照确认方案进行验证，起草验证报告。 组员：QC微生物主管，负责验证方案与报告的审核，验证过程的复核。 4.验证依据： 4.1《药品生产质量管理规范》（2010年修订） 4.2《药品生产验证指南(2003年版) 4.4《细菌内毒素检验操作规程》（SN-O08-F0061-02） 4.5《中国药典2010版二部》附录 5.验证前准备： 5.1人员培训确认： 姓名 部门 培训时间 培训内容 考核结果 《注射液细菌内毒素检测方法验证方案》（SN-AMVP2012055） 标准 所有参与人员均应培训考核合格。 结论 备注 检查人： 日期： 复核人： 日期： 5.2设备 仪器 型号 设备编码 有效期 5.3检验材料、试剂及标准品 名 称 规 格 批 号 灵敏度 内毒素含量 生产厂家 细菌内毒素检查用水 细菌内毒素工作标准品 鲎试剂 异丙醇 无热原吸头 6. 鲎试剂灵敏度复核以上批按SN-O08-F0061-02）检查法的要求复核标示灵敏度，符合规定。7.1 供试品细菌内毒素限值和最大稀释倍数的确定（L）： 7.1.1限值：每1mg中含细菌内毒素的量应小于30EU 7.1.2供试品的最大有效稀释倍数（MVD）：MVD＝CL/λ 式中：C为供试品溶液的浓度（为2.5mg/ml），其中当L以EU/ml表示时，C为1.0ml/ml；当L以EU/mg或EU/U表示时，C的单位为mg/ml或U/ml，λ为鲎试剂的灵敏度。 7.1.3最大有效稀释倍数（MVD）计算MVD＝ CL/λ ＝（2.5mg/ml*30EU/mg）/0.25 EU/ ml ＝ 300倍 7.2干扰试验 取EU/ml）一支，开启，加入1ml 溶解，置旋涡混合器上混合15分钟，得到EU/ml的溶液（以E160表示），:（选用灵敏度λ=0.25的鲎试剂进行实验） 1mlBET 0.2mlE160 0.2mlE16 1.0ml E8 1.0mlE1 1.0mlE0.5 E160/支 E160 E16 E1.6 E1 E0.5 1.8mlBET 1.8mlBET 0.6mlBET 1.0mlBET 1.0mlBET 1.0mlE0.25 1.0mlE0.125 E0.25 E0.125 E0.0625 1.0mlBET 1.0mlBET 7.2.2供试品溶液的制备 直接将供试品按最大稀释倍数稀释，即稀释300倍,供试液浓度为S300。稀释步骤如下： 0.2ml 0.5ml 5.0ml S原液 S10 S150 S300 1.8ml 7.0ml 5.0ml 7.2.3含内毒素的供试品溶液的制备 用供试品溶液将7.2.1中的同支细菌内毒素标准品稀释成4个浓度2λ（E0.5）、λ（E0.5）、0.5λ（E0.5）、0.25λ（E0.5）的含内毒素的供试品溶液。 1mlBET 0.2mlE160 0.2mlE16 1.0ml E8 1.0mlE1 1.0mlE0.5 E160/支 E160