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上课了！！ 第四章 植物细胞（组织）和  动物细胞培养反应器 第一节 植物细胞（组织）培养反应器 一。植物细胞培养过程的特点 二。植物细胞培养反应器 三。植物组织培养及反应器 第二节 动物细胞培养反应器 一。动物细胞培养法 二。细胞培养的操作方式 三。动物细胞大规模培养反应器 四。动物细胞大规模培养技术的应用 第三节 微藻培养反应器 一。微藻生物技术的优越性 二。微藻大规模培养的特点 三。微藻大规模培养反应器 前言： 进行植物细胞培养技术研究的原因： 一）植物是人类赖以生存的前提 是人类食物，药品，香料，色素的来源 二）人口过度增长和对植物药的掠夺造成植物药天然资源的匮乏 植物细胞培养技术可解决植物细胞培养周期长的矛盾 广义的植物细胞培养技术包括： 植物器官（根，枝叶，发根，胚和冠缨组织等），组织，细胞和原生质培养，并以此发展起来的各种组织细胞培养技术 植物细胞培养反应器的研制将和不同植物的不同生理，代谢方式相关，不同培养方式相关 1。植物细胞培养液的性质 植物细胞比微生物细胞要大很多 烟草细胞比微生物细胞要大50~100倍 细胞体积大约膨大105~106倍 细胞在培养液中体积将膨大40%~50% 细胞培养时，细胞形态将发生明显变化 间歇培养的初期，多半是较大的游离细胞 再由较大的细胞分裂成一个个较小的细胞 较小的细胞聚集成细胞块 生长停止后，细胞伸长，涨大，块状细胞游离分散 植物细胞培养液黏度随细胞浓度增加而显著上升 剪切应力和剪切速率之间的关系如下： 式中： M---转矩 k—粘度系数 a---常数 W----旋转黏度计转子的转速 n---流动指数 例子：烟草细胞 培养条件为30L反应器（装液量22L）转速50r/min 通气量17L/min，定时测培养液的粘度，发现n=0.67~0.74 说明：该发酵液为拟朔性流体，非牛顿流体 k值随培养过程缓慢增加，但不一定与细胞量成比例 2。植物细胞培养中的传递状态 在植物细胞培养过程中，氧的供应和传递也将影响产物的有效生产和良好的经济效益 通常植物细胞对氧的需求量要低很多，kla值过大对细胞增殖未必有什么好处 原因： kla值过大，氧传递速率过高，使培养细胞的主要挥发性代谢产物，如CO2被强制性除去而降低了细胞的增殖速度。从而导致细胞浓度降低。在kla值高的操作条件下通入一定量的CO2对细胞量的增大是有效的 植物细胞培养采用：悬浮培养 固定化细胞培养系统 悬浮培养所用生物反应器： 机械搅拌反应器 非机械搅拌反应器 固定化细胞培养反应器： 填充床反应器 流化床反应器 膜反应器 1。悬浮培养生物反应器 1）机械搅拌式反应器 优点：采用机械搅拌能使溶质均匀混合获得较高的kla(100h-1)，植物细胞培养所需的kla值一般为5~20h-1 存在问题：植物细胞壁对剪切的耐受能力差 解决办法：适当改进的搅拌式反应器 1）Tanaka认为浆形板搅拌器既能满足细胞溶氧又能满足 剪切要求 2）Kreis认为平叶形搅拌器加挡板与气升式反应器相当 3）大叶形，螺旋形等也有成功使用的报道 4）对细胞在搅拌式反应器上的长期驯化，能使细胞对剪切的耐受能力大大提高 2）非机械搅拌式反应器--------气体搅拌式反应器 利用通入的空气作通气和搅拌的生物反应器 分类：鼓泡式反应器和气升式反应器 气升式反应器又分为： 内循环和外循环两种形式 气升式反应器的特性： 流体动力学特性对kla的影响较小 氧传递系数的变化主要取决于单位体积气液表面积 气液表面积又取决于气泡的大小和总气体持有量 影响气泡大小的因素： 气体分布器设计