南瓜蛋白诱导人肝癌Hep-G2细胞凋亡实验研究.pdf

一、 中文摘要 南瓜蛋白诱导人肝癌Hep．G2细胞凋亡的实验研究 诱导凋亡作用；用NOD—SCID小鼠建立人肝癌HepG2细胞的肝原位移植瘤模型，评 价Cus在体抗肝癌的有效性；并初步探讨其诱导凋亡作用的可能机制，为南瓜蛋白 的抗肝癌机制提供理论基础。 方法： 1 MTT法测定Cus(以TCS为对照)对体外培养人肝癌HepG2细胞和人胚肝L-02 细胞增殖的影响，评价其对人肝癌细胞作用选择性； 2 利用NOD／SCID小鼠建立人肝癌原位移植模型，体内观察南瓜蛋白对人肝癌小鼠 原位移植瘤的抑瘤率。 3 电子显微镜观察南瓜蛋白作用后PANC-1细胞超微结构的改变。 4 流式细胞仪检测南瓜蛋白对HepG2细胞细胞周期和凋亡发生率的影响。 5 Annexin V／PI双染流式细胞术检测Hep62细胞凋亡 6 DNA断裂琼脂糖凝胶电泳观察是否有凋亡片段 7 ELISA检测南瓜蛋白作用后Hep 化。 8 western 化。 结果： MTT比色法结果显示，Cus对正常人胚肝(L一02)细胞的毒性作用(IC∞为 20．85u u g／m1)远小于对人肝