慢病毒载体介导Bdnf基因修饰的骨髓间质干细胞移植治疗脑梗死.pdfVIP

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2008, July 25; 24(7): 1174-1179 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ © 2008 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 研究报告 慢病毒载体介导Bdnf 基因修饰的骨髓间质干细胞移植 治疗脑梗死 1,2 1,2,3 1,2 2 1,2,3 4 黄东煜 , 张志坚 , 陈柏龄 , 吴秀丽 , 王柠 , 张彦定 1 福建医科大学附属第一医院神经内科, 福州 350005 2 福建省神经病学研究所, 福州 350005 3 福建医科大学神经生物学中心, 福州 350004 4 福建省师范大学生命科学学院, 福州 350007 摘 要: 为研究经Bdnf 基因修饰的骨髓间质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)对脑梗死的协同治疗作用, 构建带 有大鼠Bdnf 基因之慢病毒载体, 并感染大鼠骨髓间质干细胞(Rat mesenchymal stem cells, rMSCs) 。运用线栓法制备大鼠 大脑中动脉栓塞模型, 经尾静脉注射移植, 对照组注射0.1 mol/L 磷酸盐缓冲液(PBS)1 mL, Bdnf -rMSCs 和Mock-rMSCs 组分别注射Bdnf -rMSCs 细胞悬液以及未插入目的基因的空病毒载体感染后的rMSCs 细胞悬液各1 mL。各组大鼠分别 于术后24 h 、移植后2 周及2 月应用modified Neurological Severity Scores (mNSS)评价神经功能状况。结果显示, 与对 照组相比, Mock-rMSCs 及 Bdnf -rMSCs 移植组神经功能改善明显, mNSS 评分差异有统计学意义(P0.001), 而且 Bdnf -rMSCs 移植组明显优于Mock-rMSCs 移植组(P0.001) 。移植后2 周及2 月, 与对照组相比两移植组梗死区脑组织 结构恢复较好, 均可见EGFP 阳性细胞在梗死区及其周边区聚集并存活, 并有部分细胞出现神经元样改变。Bdnf - rMSCs 移植组中移植细胞大量表达 BDNF, 两移植组中均有部分植入细胞表达神经细胞表面标志物。研究表明Bdnf 基因修饰 的rMSCs 经静脉移植后可迁移至脑梗死灶周围, 向神经细胞分化并长期存活。移植后的干细胞可与其分泌的BDNF 协 同促进脑梗死后神经功能恢复, 这为将来基因工程干细胞移植治疗脑梗死提供了实验依据。 关键词: 骨髓间质干细胞, 脑源性神经生长因子(BDNF), 静脉移植, 大鼠, 脑梗死 Therapeutic Efficacy of Lentiviral Vector Mediated Bdnf Gene-modified MSCs in Cerebral Infarction 1,2 1,2,3 1,2 2 1,2,3 4 Dongyu Huang , Zhijian Zhang