HIV-1Nef重组重叠肽诱导小鼠免疫保护作用研究.pdfVIP

２０１２年 １０月　　　　　 首 都 医 科 大 学 学 报 　　　Ｏｃｔ．２０１２ 第３３卷　第５期　　　　 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｖｏｌ３３　Ｎｏ５ ［ｄｏｉ：１０３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ１００６７７９５２０１２０５００１］ ·中西医结合临床与基础 · ＨＩＶ１Ｎｅｆ重组重叠肽诱导小鼠免疫保护作用研究 张宏伟　张　彤　夏　炜　吴　昊 （首都医科大学附属北京佑安医院感染科，北京 １０００６９） 【摘要】　目的　 探讨ＨＩＶ１Ｎｅｆ重组重叠肽诱导小鼠细胞免疫应答的效果。方法　以ＨＩＶ１ＬＡＩＮｅｆ重组重叠肽和相应蛋白免 疫接种ＢＡＬＢ／ｃ和Ｃ５７ＢＬ／１０小鼠，每组５例，分离小鼠脾单个核细胞（ｓｐｌｅｅｎｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌ，ＳＭＣ），以ＥＬＩＳＰＯＴ和流式细胞术 检测特异性细胞应答，以大剂量Ｎｅｆ重组痘苗病毒攻击试验检测重组重叠肽对免疫小鼠的保护作用。结果　在Ｃ５７ＢＬ／１０小鼠 ６ 中，佐剂组ＥＬＩＳＰＯＴ为阴性，重叠肽组和相应蛋白组ＬＡＩＮｅｆ特异性细胞免疫应答分别为（１４５７±３６２）ＳＦＵ／１０ＳＭＣ和（２４２ ６ ６ ６ ±１０２）ＳＦＵ／１０ＳＭＣ（Ｐ＝０００１），在 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠中分别为（１４８８±５０４）ＳＦＵ／１０ＳＭＣ和（１９８±９０）ＳＦＵ／１０ＳＭＣ（Ｐ＝ ６ ６ ０００４），而ＮＬ４３Ｎｅｆ特异性细胞免疫应答分别为（１０４０±３３８）ＳＦＵ／１０ＳＭＣ和（２０７±９５）ＳＦＵ／１０ＳＭＣ。重组重叠肽疫苗 ＋ ＋ 诱导的Ｎｅｆ特异性ＣＤ 和ＣＤ 细胞的百分比分别为１５３和０８０。在攻毒试验中，重叠肽组、蛋白组、佐剂组和空白对照组的生 ４ ８ 存率分别为８０％、４０％、２０％和０％。结论　重组重叠肽免疫小鼠可产生具有保护作用的较强的广谱特异性细胞免疫应答，对于 不同株系的Ｎｅｆ具有交叉反应，重组重叠肽的免疫接种效果强于相应蛋白。 【关键词】　 ＨＩＶＮｅｆ；重组重叠肽；免疫保护；小鼠 【中图分类号】　 Ｒ５１２９１ ＩｍｍｕｎｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙＨＩＶ１Ｎｅｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇｐｅｐｔｉｄｅｓ ｉｎｍｉｃｅ  ＺＨＡＮＧＨｏｎｇｗｅｉ，ＺＨＡＮＧＴｏｎｇ，ＸＩＡＷｅｉ，ＷＵＨａｏ （ ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＤｉｓｅａｓｅｓ，ＢｅｉｊｉｎｇＹｏｕａｎＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００６９，Ｃｈｉｎａ） 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙＨＩＶ１Ｎｅｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇｐｅｐｔｉｄｅｓｉｎｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＢＡＬＢ／ｃａｎｄＣ５７ＢＬ／１０ｍｉｃｅｗｅｒｅｉｍｍｕｎｉｚｅｄｗｉｔｈＨＩＶ１Ｎｅｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇｐｅｐｔｉｄｅｓａｎｄｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｗｉｔｈ５ｍｉｃｅｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ｓｐｌｅｅｎｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌｓ（ＳＭＣ）ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｓｐｅｃｉｆｉｃｃｅｌｌｒｅｓｐｏｎｓｅｓｂｙＥＬＩＳＰＯＴａｎｄｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．ＬａｒｇｅｄｏｓｅｓｏｆＮｅｆ