L-色氨酸生物合成代谢流量分析.pdfVIP

卷 期 ! ! 微 生 物 学 报 ’( )! /’ )! 年 月 #$$ % !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,+-. #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! !色氨酸生物合成的代谢流量分析 王 健 陈 宁 张 蓓 谭青乔 张克旭 （天津科技大学食品科学与生物工程学院 天津 $$### ） 摘 要：建立了谷氨酸棒杆菌合成 色氨酸（ ）的代谢流量平衡模型，应用该模型计算出 E6 E63FD 发酵中后期的代谢流分布并通过 软件线性规划得到 理想代谢流分布。结果表 G*3E*H 3FD 明 的碳架进入糖酵解， 的碳架进入 途径；但与理想代谢流相比，应从遗 27 I 17 J #! I%7 J KGL 传改造和发酵控制方面降低 3M* 循环的代谢流，减少副产氨基酸的生成，摸索最适的溶氧控 制对提高3FD 产率至关重要。 关键词：色氨酸，代谢流平衡模型，代谢流分析，线性规划 E6 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） 3N0## * $$$165#$0 #$$ $!6$!26$% 色氨酸是人体和动物生命活动中 种必需氨基酸之一，对人和动物的生长、发育和 E6 % 新陈代谢起着重要的作用，广泛应用于医药、食品和饲料等方面。如何提高色氨酸发酵产 率是目前一个重要课题。近年来，人们通过代谢工程方法改变细胞内部的代谢流分布，使 ［，］ 其生成更多的产物。代谢流分析（ 1 # ， ） 是代谢工程中用以指导 G4.9O’(= P(+: 9?9(D-=- G8* 遗传操作的重要工作，是代谢网络分析的基本方法。G8* 围绕胞内代谢反应，使用物料 衡算方法，对所有主要的胞内反应建立一个基于化学计量的代谢流平衡模型（ G4.9O’(= P(+: O9(9?4 ’Q4( ， ），并利用该模型计算不同途径的代谢流分布。本文通过建立色氨酸生物 G8H 合成的代谢流平衡模型，对代谢网络进行了定量分析和网络优化分析，并计算出色氨酸分批 发酵中后期的代谢流分布，以期对色氨酸产生菌的遗传操作和发酵控制提供指导。 # 材料和方法 #$ # 供试菌株 谷氨酸棒杆菌（ ） （ 6 6 F S F !#$%’()*#+,- ./,*(-+),- 3N### LR4 S 3DF S 7G3 S TUF 783 S MV/F ），天津科技大学代谢控制发酵研究室保藏菌种。 #$% 培养基 活化培养基、种子培养基和发酵培养基的成份见文献［］。 #$ 培养方法 斜面活化培养： 培养 。 #$ $ #