采后两种不同果肉类型油桃软化相关酶活性的变化.pdfVIP

l72 热 带 热带植 物学报 第 l0卷 用[31。Dawson等 【发现在油桃 果实软化过程中有果胶多聚物增溶、解聚 ，并有半乳糖基多 糖的损失，间接证实 PG对果实软化的作用 。Artes等 【认为油桃早熟品种果胶 甲酯酶主 导果肉软化 ，中熟品种则是 PG的作用更显著。近年来，果 肉细胞 内含物的变化及相应水 解酶如蔗糖酶 、淀粉酶等酶的变 化，引起 了人们的重视 【 ，但这些酶在油桃 软化 中的作 用 ，报道 尚少 。本实验 以软质油桃 “秦光 ”和非软质油桃 “阿姆 肯 ”为试验材料 ，研 究细 胞壁降解酶 PG、果胶 甲酯酶 、纤维素酶以及细胞 内部 的水解酶类如淀粉酶、蔗糖酶变化 的特点及其与果肉软化的关系，旨在探讨油桃软化的机理，为油桃的保鲜提供理论依据 。 1材料和方法 材料 本试验于 l998-l999年在西北农林科技大学 园艺学院综合实验 室进行 ，实 验油桃 (件Mn persicayar．nl1．cipersica)品种为 “秦 光 ”(软质 )和 “阿姆 肯 ”(非软质 )， 采 自杨凌一 5-6年生油桃 园。果实八成熟时采收 (“秦光 ”底 色 由绿转 白，“阿姆 肯”底 色变黄)，采收后立即运 回实验室 ，选择色泽均匀 、大 小一致的正常果实 。每 品种设三次 重复 ，每重复 l5kg果实，用塑料袋包装 (敞 口)，每一袋为一重复，于常温 下贮藏 。每两 — o 世 天取样一次，测定理化指标 。 n∞ 山J 果实硬度 随机从两品种中选取 5个果实，于果胴部取 6点 ，GY．1型硬度计测 6 d 2 0 8 6 定，取均值 。 酶液的提取 随机从两品种 中各选取 5个 果实 ，每 品种取 10g果肉，在 4~C下解 冻后 ，冰浴 条件下研磨 ，加 入预冷 的 20ml提取液 (0．2mol／L 的磷酸二钠 一柠檬 酸缓冲 液 ，pH 5．5，含 6％NaC1(w／v))，4℃下放 置 30min，不 断搅 动 ，促 进 酶 蛋 白的提 取 ， l0000Xg下离心 l5min，收集上清液，备用 。 淀粉酶活性测定参考王贵禧 【】的方法 ，以热杀死酶液为对照，反应 时间30min。 蔗糖酶测定参考张利平等 【的方法 。 纤维素酶活性测定参考徐 昌杰等 【】的方法 ：lml0．1％的羧 甲基纤维素溶液 (Sigma 产品)中加入粗酶液 1ml，37％恒温水浴 中反应 3h。用 3，5．二硝基水杨酸测定反应产生 的还原糖量 。 PG酶活性测定参考梁小娥的方法 【，反 应体系为：lml0．1％的果胶溶液 (Simg a产 品) 中加入粗酶液 lml，37％恒温 水浴 中反 应 2h。用 3，5一二硝基 水杨酸测定反应产生 的还原糖量 。以上 四种酶活性以每小时产生 lmg葡萄糖为 1个活性单位 。 果胶 甲酯 酶 取 2ml粗 酶 液 ，加 入 l0ml0．1％的果胶溶液 中，反应 2h，采用 0 2 4采后6天数R 10 12 14 I8 1820 Days after harvest 0．05mol／L的NaOH 滴定反应释放 的游离羧 图1“秦光”(_)和 “阿姆肯”(◆)油桃采后果实硬度的变化 基，以um。羧基gFW‘h为一活性单位。 g·Ch ： ’nga“ng”‘an 丁■ 第 2期 彭丽桃等：采后两种不同果肉类型油桃软化相关酶活性的变化 173 以上测定重复三次 ，取均值 。 2结果和分析 2．1果 肉软化的特点 果实硬度 的大小是 反应果实耐贮性 、判断果 肉质地变化 的重要指标 。如 图 1所示 ，软 质油桃 “秦光 ”与非软质品种 “阿姆肯 ”