含有H5N1 NA基因重组腺病毒疫苗在小鼠体内的免疫效果研究.pdfVIP

中华实验和临床病毒学杂志2009年12月第垫鲞箜 塑 ! 』苎巳 !旦嬖! 竺 ! ： !- 449 ． 论 著 含有 H5N1NA基因重组腺病毒疫苗在 小 鼠体内的免疫效果研究 马晶，张晓光 ，李魁彪，张晓梅，王敏 ，白天，杨亮，徐红，舒跃龙，曾毅 【摘要】 目的 考察含有禽流感病毒 A／Anhui／1／2005(H5N1)优化型 NA基因的重组腺病毒在 BALB／小鼠体 内的免疫效果 ，并筛选合适 的免疫剂量。方法 重组病毒以肌内注射方式在第 0周和 第4周免疫 BALB／小 鼠两次，低 、中、高组的免疫剂量分别是 1o5、l0 和 109TCID ，次，第 5周时分别 使用神经氨酸酶活性抑制试验和 ELISpot实验来检测和比较疫苗的体液和细胞免疫效果。结果 重 组病毒免疫后 的小 鼠均可检测出针对NA抗原 的特异性体液和细胞免疫反应 ，并且免疫效果与免疫 剂量呈正相关 ，10TCIDso／P．／次是合适 的免疫剂量 。另外 ，从包含 NA全长氨基酸残基 的合成肽库中 筛选到两个能够刺激 BALB／c小 鼠T淋巴细胞分泌 IFN-7的表位 ，即NAl… ：CRTFFLTQGALLNDKH和 NA ：AvAvLKYNGIITDTIKsw。结论 含有优化型NA基因的重组腺病毒疫苗能够诱导 BALB／c小 鼠同时产生 NA抗原特异性的体液和细胞免疫反应 ，是较好的H5N1流感病毒候选疫苗株 ，值得进一 步深入研究。 【主题词】 流感病毒，A型； 神经氨酸酶； 腺病毒，人； 免疫，主动 Studyon immunogenicity ofa r~ ombniantadenovirusvaccinecontainingneuraminidasegeneofH5N1 influenzavirus(A／Anhui／l／2005)inmice MAJing ，ZHANGXiao-guang，L1Kui-biao，ZHANGXiao-mei， WANGMin，BAITian，)SANGLiang，XUltong，SHUYue-long，ZENGYi． TheCollegeofLifeScienceand Bioengineering，BeltingUniversityofTechnology，Befiing100022，China Corresponding 0 ，mr：Zeng Yi，Email：zengy@ public．bta．net．cn 【Abstract】 Objective Toinvestigateimmunityofarecombinantadenovirusvaccine(rAdV)containing eodon-modifiedneuraminidase (Mod．NA)geneofH5N1influe~avirusinBALB／cmiceandtosereenfor appropriatedose．Methods BALB／cmicewereimmunizedwiththerAdV-Mod．NA vaccineintramuscularlytwice (doubleinjectionat0and4 week)inthreegroups，lowdosage(10 TCID5operdose)，mediumdosage(10 TCID5operdose)andhighdosage(109TCID5operdose)．Theeffectofhumoralandcell—mediatedimmunitywere analysedat5 week．Results ①TherAdV．Mod．NAvaccinecouldelicitbothhumoralandcel1．mediatedrobust NAspecificimmunityinmicebyneuraminidaseinhibitorassayandIFN一 ELISpotassay；② 107TCID5operdose was the appropriate dose； ⑧ Peptide NA109．124： CRTFFLTQGALLNDKH and peptide NA182．I99： AVAVLKYNGIITDTIKSW were thedominantepitopesofrneura