siRNA抑制ZNF139前后人胃癌原位移植祼鼠血清差异蛋白质的筛选与鉴定.pdfVIP

目 录 0IIIIIIIIIIIIII IIIIIIIIIIIIl Y23371 67 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………4 英文缩写……………………………………………………………………8 研究论文siRNA抑制ZNFl39前后人胃癌原位移植裸鼠血清差异蛋白 质的筛选与鉴定 前言……………………………………………………………………9刖吾…………………………………………………………………… 材料与方法……………………………………………………．……1O 结果……………………………………………………………．20多日木……………………………………………………………． 附图…………………………………………………………………．23 附表…………………………………………………………………．32 讨论…………………………………………………………………．35 结论…………………………………………………………………．40 参考文献……………………………………………………………．40 综述差异蛋白组学在胃癌研究中的应用………………………………44 致谢………………………………………………………………………．55 个人简历…………………………………………………………………．56 中文摘要 si RNA抑制ZNFl39前后人胃癌原位移植裸鼠 血清差异蛋白质的筛选与鉴定 摘 要 目的：以胃癌SGC7901细胞原位移植裸鼠模型为对象，通过荧光双 组学方法研究抑制ZNFl39后对胃癌原位移植裸鼠血清的影响，为 ZNF139参与胃癌进展并发现新的肿瘤标志物提供依据。 方法： siRNA．ZNFl39表达质粒。通过X．tremeGENE HP转染试剂介导转染胃癌 mRNA的相对表 细胞株SGC7901，并通过qRT-PCR检测细胞中ZNFl39 达量，计算其抑制效率。 4天测量皮下瘤长短径，待皮下瘤直径约1．0cm左右时取出，剪成大小约 lmm3瘤块进行鼠间传代，将第六代皮下瘤应用OB生物胶粘贴法进行原 位移植。 3用血清白蛋白／免疫球蛋白清除试剂盒去除胃癌原位移植裸鼠血清 中高丰度蛋白，利用SDS．PAGE检测去除高丰度蛋白前后蛋白的完整性 及血清蛋白的变化。 1 4采用2D．DIGE技术分离siRNA．ZNF 39干扰前后胃癌原位移植裸 Differential 鼠血清蛋白。应用DeCyder Software选取差异明显的 Analysis 蛋白点并利用Ettan spotpicker挖取胶中的差异蛋白点，胶内酶解后利用 据库检索。 5将已鉴定的部分差异蛋白通过蛋白质印记(Western blot)从蛋白质 水平进行验证，检测是否与蛋白质组学结果一致。 结果： 中文摘要