iNOS抑制剂1400W对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及VEGF表达的影响.pdf

摘要 摘要 目的 nitric oxide 研究诱导型一氧化氮合酶(inducible synthase，iNOS)选择性抑 影响。 方法 1．体外正常培养条件下，分别采用不同浓度(12．5，25，50，100，200， 400|I 增殖的改变；流式细胞仪(FCM)分析各组人肝癌细胞株SMMC一7721细胞周 期及细胞凋亡的变化；硝酸还原酶法测定各组人肝癌细胞株SMMC一7721培养 oxide 上清液中一氧化氮(NitricNO)水平变化；RT—PCR检测各组人肝癌 细胞株SMMC-7721中iNOS和VEGFmRNA含量的改变。 2．体外缺氧培养条件下，根据MTT结果，分别采用不同浓度(50，100，200 It 法测定各组人肝癌细胞株SMMC-7721培养上清液中N0水平；RT—PCR检测各 组人肝癌细胞株SMMC一7721中iNOS和VEGFmRNA的含量改变。 结果 1．MTT检测结果显示，不同浓度1400W对细胞生长均有抑制作用，且同一时间 It u 的抑制作用呈一定的剂量一时间效应依赖关系。50mol／1、100mol／1、 200llmol／1、400 p ％、31．34％、34．33％。 u 2．细胞周期分析显示，50umol／1、100mol／1、200|lmol／11400W处理细胞 u 少(PO．05)，且1400W浓度越高，该作用越强，其中200mol／11400W处 1400W Ilmol／1、200umol／1 同时1400W还能诱导SMMC一7721细胞凋亡，100 II 摘要 浓度1400W对细胞生长抑制作用可能与细胞生长周期受抑制有关。 3．硝酸还原酶法检测结果显示，体外常规条件培养下，不同浓度1400W处理细 胞后，对细胞N0释放均有抑制作用，且同一时间各组与对照组相比差异有 u u 范围内呈剂量一时间效应依赖关系；其中50mol／1、100mol／1、 200 umol／1、400umol／1 1400W作用细胞72h后，细胞培养上清液中N0 mol／1。 u 缺氧条件培养下，50mol／1、100umol／1、200umol／11400W处理细胞24h 17．23±2．4u 一效应依赖关系。 M 4．RT—PCR检测结果显示：(1)体外常规培养条件下，对照组、50IlM组、100u 组、200p M组、100uM组、200u 体外缺氧培养条件下，对照组、50p M组处理细胞 24h后， iNOSmRNA表达(PO．05)、VEGFmRNA表达(PO．05)