毛细玻管玻璃化冷冻法冷冻保存牛卵母细胞的研究.pdfVIP

《黑龙江畜牧兽医》科技版 2009年 l2月 (上)l5 毛细玻管玻璃化冷冻法冷冻保存牛卵母 细胞的研究 包华琼 ，李跃民 ，王新庄 (1．重庆市人 口和计划生育科学技术研究院 ，重庆 400020；2．西南农业大学 重庆市牧草与草食家畜重点 实验室，重庆400716；3．河南省肉牛工程技术研究中心，河南 郑州450003) 中图分类号：$813 文献标识码：A 文章编号 ：1004—7034(2009)12—0015—04 关键词：毛细玻管玻璃化冷冻法；牛；卵母细胞 摘 要：为了探讨毛细玻管玻璃化冷冻法(GMP)对牛卵母细胞冷冻效果的影响，试验采用毛细玻管 玻璃化冷冻法冷冻不同发育阶段的牛卵母细胞，并且对不同预处理方式和玻璃化时间对玻璃化冷冻 牛卵母细胞解冻后形态及体外受精卵裂率的影响进行了比较。结果表明：采用毛细玻管玻璃化冷冻 法冷冻 GV期和体外培养 6h、18h、22h各发育阶段的卵母细胞，解冻后体外受精后卵裂率分别是 36．67％、4O．98％、41．27％、52．38％，前三者之间差异不显著 (P0．05)，前三者与培养22h卵母细 胞 (52．38％)和对照细胞 (68．42％)差异极显著 (P0．01)；采用不同浓度的稀溶液预处理卵母细 胞，3％乙二醇稀溶液预处理玻璃化前牛卵母细胞可分别获得较高的卵裂率(36．96％)；卵母细胞在 玻璃化溶液中暴露时间越长受到损伤越严重，暴露30S能获得最好的玻璃化冷冻效果。 VitrificationofbovineoocytesbyglassmicropipetteforcryOpreserVatiOnstudy BAOHua—qiong ，LIYue—min ，WANG Xin—zhuang (1．ChongqingAcademyofPopulationandFamilyPlanning，Chongqing400020，China；2．ChongqingKeyLaboratoryof Forage ＆Herbivore，SouthwestA cultureUniversty ，Chongqing400716，China；3．TheCenterofCow EngineeringinHenan， Zhengzhou450003，China) Keywords：GMP；bovine；ooc~e Abstract：Glassmicropipette(GMP)vesselforvitrifyingthevariousbiologicalmaterialsofrindefinitestoragehasbeendevelopedasoneofthe importanttechniques．Thisstudyreportsthedefrozenactivitiesofbovineooc~esaftervitrificationandcryopreservationusingGMP．Thenormal morphologicalfeaturesandcleavageratios／matureratioswereusedforevaluationtheoocyteactivitiesafterthetreatment．Firstlythedifferent concentrationsofethyleneglycol(EG)andvitrificationsolution(VS)pretreatedgerminalvesicle(GV)oocyteswereinvestigated；thenthe differentvitrificationtimewasassessed：thenfurthertheoocytesonthedifferentdevelopmentstageswereevaluated．Thedatashowthat3％ EG isthebestconditionofrooc