兔抗人免疫相关乌苷三磷酸酶基因多克隆抗体的制备与鉴定.pdfVIP

ChinJClinNeurosci2009，17(6)，601-605 兔抗人免疫相关乌苷三磷酸酶基 因多克隆抗体的 制备与鉴定 赵桂完 ，吴志英 一，陈万金 ，林 毅 ，王 柠 (福建医科大学附属第一医院神经内科 350005；复旦大学附属华山医院神经内科200040) 关键词 免疫相关鸟苷三磷酸酶基因； 融合蛋 白；多克隆抗体 摘要 目的：表达人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因(IRGM)a全长融合蛋白，制备高质量的免抗人IRGM 多克隆抗体。方 法：将IRGMa全长cDNA片段分别克隆到原核表达载体pGEX一4T一2和真核表达载体pCMV—myc，测序验证序列正确。 在大肠埃希菌E．coliBL21中表达IRGMaG／ST融合蛋白，用纯化的可溶性IRGMa／GST融合蛋白免疫新西兰大 白兔，制 备兔抗人IRGM抗体，采用ELISA、免疫印迹和竞争抑制等多种方法验证其敏感度和特异度。结果：自制的兔抗人 IRGM多克隆抗体的特异度和敏感度均较高，效价更高于市售抗体。结论：成功制备了免抗人IRGM 多克隆抗体，为 进一步的功能研究打下基础。 PreparationandIdentificationoftheRabbitAnti-humanImmune-relatedGeneGuanosineTriphosphate PolyclonaiAntibod