华北大黑鳃金龟中肠丝氨酸蛋白酶cDNA克隆_序列分析及表达_刘海明.pdfVIP

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2017-09-01 发布于广东
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华北大黑鳃金龟中肠丝氨酸蛋白酶cDNA克隆_序列分析及表达_刘海明.pdf

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: 昆虫学报Acta Entomologica Sinica ，February 20 12 ，55 (2) 147 － 155 ISSN 0454 -6296 华北大黑鳃金龟中肠丝氨酸蛋白酶 cDNA 、克隆序列分析及表达 * ，，，刘海明郑桂玲李长友周洪旭 ( ，， 266109) 青岛农业大学农学与植物保护学院山东省植物病虫害综合防控重点实验室山东青岛 : ，，摘要丝氨酸蛋白酶是昆虫体内一类重要的消化酶为了了解该类酶的分子特性及功能本研究利用粉纹夜蛾 Trichop lusia ni Holotrichia oblita cDNA ，围食膜蛋白多克隆抗体筛选华北大黑鳃金龟中肠表达文库首次得到编码华 cDNA ， HoSP1 (GenBank FJ573146)。，北大黑鳃金龟丝氨酸蛋白酶序列命名为登录号为序列分析表明该基因长 902 bp ， (ORF) 783 bp ， 260 ， pI 26． 7 kDa 4 ． 19 ， N- 开放阅读框长编码个氨基酸推测分子量和值分别为和不含有， Thr O- ， 6 ， 3 ，糖基化位点但在 157 处有一个糖基化位点含有个保守的半胱氨酸残基组成对二硫键对于维持蛋白。， (His)、 (Asp)、质的三级结构起着重要的作用通过与几种丝氨酸蛋白酶的比对发现该酶具有组氨酸天冬氨酸 (Ser) ， Costelytra zealandica 14 ，丝氨酸催化中心与褐新西兰肋翅鳃金龟的种丝氨酸蛋白酶有明显的相似性其中 CzSP3 ， 52 ． 47% 。 pET21b ，， BTEE ，与