柠檬酸液态发酵及提取工艺2.pptVIP

种子制备方法二 接种：用无菌水将麸曲孢子制成孢子悬液，按1‰接种于摇瓶中； 接种量：一支斜面接4～5瓶， 摇瓶培养：八层纱布盖口，回旋式摇床，38℃，100转/min培养20 h；或35℃下、转速200r/min(24h前l00，24 h后200r/min)、300r/min(24h前l00，24h后300r/min) ，培养3～4 d。 镜检：显微镜观察，处于快速生长期，可用于接种。 1.4.2 发酵液预处理 取细度为60目以上的玉米粉300g装入2000ml烧杯中，加入1000mL水和7～8个单位α-淀粉酶(高温)/g玉米粉； 于80℃液化l0min后，继续加热至90℃保温30min，碘检不变色后，再加热到100℃煮沸(5～l0min)，趁热经过二层纱布过滤; 滤液加水冷却并调整糖度至15％～20％和蛋白质含量不超过4g/L，pH6.0。 取过滤清液50 mL分别装入500mL三角瓶中，瓶口塞入8层纱布包扎好，于121℃灭菌15～20min，冷却备用。 1.4.3 发 酵 为两个阶段： 第一阶段为前24 h，温度32～35℃，转速100 r/min ； 第二阶段为24 后 ，温度35℃，转速200 r/min； 发酵0、24、48、72、96h取样，0 h样品直接取1瓶作对照，并从中取10 ml冷冻保存。其它时间取样时，每个样品仅取1 ml冷冻保存，取样时用试纸现场检测pH值。