超临界CO-%2c2-体系下固定化亚油酸异构酶的催化反应.pdfVIP

摘要 本文以实验室分离鉴定的一株植物乳杆菌Lactobacfllus plantarum，LT2．6发酵产生的能将 Linoleic 亚油酸(Linoleic Acid，CLA)的弧油酸异 Acid，LA)异构化为共轭亚油酸(Conjugated 构酶作为酶源，以提高酶的利用率、实现酶与脂溶性底物的均相传质反应为目的，将固定化酶 Carbon 作为生物催化剂，以超临界C02(Supercriticaldioxide，SCC02)作为反应介质，对亚油 酸异构酶催化异构反应性质进行了初步探讨。 首先进行了固定化方法和载体的筛选，固定化条件的确定，酶性质的表征。得出：采用海 范围内酶的存放稳定性较好；固定化酶热稳定性温度范围有所增加；固定化酶反应最适pH6．5， 6．5，30℃为固定化酶循环反应生成CLA ％。k1．092¨mol／h·nag；进行5次循环反应，确定pH 的有效pH值和有效温度。以上的研究表明，海藻酸钙包埋法固定化亚油酸异构酶在合适的条 件下酶活较高，固定化酶的质最受海藻酸钠浓度、固定化酶量、固定化时间以及CaCl2浓度的 影响，由此制得的固定化酶的固定化率可达98．2％，其热稳定性、pH值稳定性均高于游离酶， 机械强度较好，小球制作容易，并可重复使用。 SCCO：体系下，考察了压力，温度，作用时间，含水量，卸压时间对凝胶颗粒完整率和酶 的稳定性影响。在不同条件下，影响因素作用的程度不同；快速卸压会引起CO：相变甚至颗粒 破裂，卸压越快，海藻酸钙胶体的完整率越低：估算底物在不同压力下SCC02的相对溶解度参 次循环反应，前2次重复使用具有较好的异构化酶活力；处理的初期海藻酸钙具有抗压抗渗透 的保护作用。因此，在scc02体系下，初步实现了海藻酸钙包埋亚油酸异构酶催化底物LA的 转化反应，并可重复使用。 关键词：酶固定化，海藻酸钙，超临界二氧化碳，亚油酸异构酶 Abstract ALinoleicAcidisomerasefermentationwithaLactobacillus by plantarum∞．plantarumLT2-6)， whichscreenedasa bacterium toisomerizesLinoleie to havinghighcatalysis Acid(LA)in Linoleic studiedinthis wasaimedto ConjugatedAcid(CLA)，was paper,which improveenzymatic utilizationratioandtoactualize isomeric reactionbetween and homogeneouscatalysis enzynle substance．ImmobilizedLAisomeraseasthe and Carbondioxide liposoluble biocatalystSupemritieal thereaction studiedforthe isomeric (SCC02)as medium，were enzymaticcatalysis． researchincludedselectionofimmobilizedmethodsand ofthe First，the supporter,determination immobilized