实验感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体水平的观察.pdfVIP

塑划点堂2QQi厦熊尘掌焦迨塞 塞墅壁銎尘鼠囱江生遗篮垂虫抗佳坐：L的麴塞 实验感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体水平的观察 硕士研究生 来利红 导 师 王中全崔晶 郑州大学基础医学院寄生虫学教研室(郑州450052) 河南省分子医学重点学科开放实验室(郑州450052) 摘 要 旋毛虫病是一种严重的人兽共患寄生虫病，主要因生食或半生食含有旋毛虫幼虫囊包 的猪肉或其它动物肉类而感染。因此，对肉类及肉制品中进行旋毛虫榆疫是旋毛虫病防治 工作的重要内容。目前用于肉类中旋毛虫检疫的方法有旋毛虫镜检查法和人工消化法，但 前者的敏感性低，而后者操作较复杂不易推广应用。由于IgG抗体在宿主血液和组织液内均 有分布，应用免疫学方法从动物肉汁中进行抗旋毛虫抗体的检测有望用于旋毛虫的检疫。 然而，关于动物感染旋毛虫后肉汁中抗体水平的动态变化尚未见报道。鉴于此，本文应用 旋毛虫小鼠动物模型，通过间接ELIsA对不同剂量旋毛虫感染小鼠后不同时间Jfn清和肉汁 的抗体水平进行了研究；并对小鼠肌肉在不同温度下保存不同时间后肉汁抗体水平的动态 变化进行了观察。 材料和方法 1．对ELIsA检测旋毛虫感染小鼠肉汁抗体的最适条件进行了选择，包括抗原的最适包 被浓度及血清最佳稀释度，酶标二抗、肉汁最佳稀释液及最佳稀释度的选择。 同剂量旋毛虫后不同时间(1．18周)血清及肉汁抗体水平的变化。 条旋毛虫，感染6后周观察小鼠膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平的关系。 4．将70只健康昆明小鼠随机分成5组，每组14只。5组分别感染不同种的旋毛虫(旋 毛虫、乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫)，每只感染500条幼虫。感染后 塑刖盘警!Q竖厦熊±堂焦造塞塞墼壁鎏尘匦囱泣生拯旋垂直垃篮盛坐曲型塞 染不同种旋毛虫小鼠的血清和肉汁抗体平。 5．将30只感染旋毛虫小鼠(500条幼虫／只)，感染40天后剖杀，制备混合肉样，每 份混合肉样重19，分别置于塑料容器中密闭，在4℃保存l一7天及．20℃保存l。20刷，观察 肉样保存不同时间后肉汁抗体水平的变化。 结 果 1．选择了ELlSA检测抗旋毛虫抗体的最适条件。Es抗原的最适包被浓度为5Hg，m1， 血清最佳稀释度为l：50，包被抗原为Es抗原，酶标二抗为HRP．羊抗小鼠lgG，稀释液为 含3％脱脂奶粉的PBST，肉样与稀释液比例为lg肉样用4ml稀释液。 2．每只感染loo、300、soo条旋毛虫的轻、中、重度感染组小鼠血清及肉抗体水平均 随均染后时间的延长而逐渐升高，重度感染组的抗体检出时间比轻度感染组早I周。在感 染后第8周，3个感染组的血清及肉汁抗体水平达到高峰，随后抗体水平虽有所下降，抗 体阳性率仍均为100％并持续至实验结束时的感染后第18周。在3个感染组小鼠血清与肉 汁抗体水平具有相关性(PO．05)。 与血清及肉汁抗体水平均无相关性，但与感染剂量有相关性(F0．999。PO．05)。 4．用不同种旋毛虫感染小鼠后发现，旋毛虫感染的小鼠肌肉虫荷最高(400．2士143．9)， 乡土旋毛虫感染小鼠的虫荷最低(225．6士81．6)，而布氏旋毛虫、伪旋毛虫及纳氏旋毛虫感 染小鼠的肌肉虫荷量适中。用旋毛虫肌幼虫Es抗原ELIsA检测分别感染不同种旋毛虫小 鼠的血清及肉汁抗旋毛虫抗体阳性率均为100％。乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳 氏旋毛虫感染小鼠血清及肉汁抗体水平相比较均无显著性差异(P0．05)，且血清及肉汁 抗体水平具有相关性(PO．05)。结果表明在旋毛虫、乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛 虫及纳氏旋毛虫感染时，均可用肉汁替代血清作为旋毛虫病的检测样本。 5．感染旋毛虫小鼠肌肉在4℃保存7天后与第l天相比肉汁抗体水平(0D值)无显 相比无明显下降(尸O．05)；虽然保存lO周的肉汁抗体水平与保存1周的相比已有显著性 差异(尸O．05)，但旋毛虫抗体仍均阳性并持续至实验结束时的保存20周。 Il 塑划厶堂2QQ§厦亟±堂焦迨塞