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摘要
本文对重组大肠杆菌分批.补料培养生产类人胶原蛋白的发酵条件即诱导时
机和诱导强度、富氧方式(葡萄糖反馈调控、适当提高罐压、通入富氧空气)、
诱导前后比生长速率、补氮方式(连续补氮、阶段式补氮)、动力学模型进行了
系统的研究,结果表明:
ac保温2~3h,然后降温至
1.最佳诱导条件为对数生长中后期进行诱导,42
39oC继续培养5-6h,发酵结束时细胞浓度和类人胶原蛋白的浓度可分别达
68.94
VL(DEW)和13.16g/L。
2.诱导前的比生长速率影响细胞生长和类人胶原蛋白的表达,为获得尽可
能多的细胞和目标蛋白,诱导前的最适比生长速率为O.15加.20h~:诱导后的比
生长速率对表达期的细胞生长和类人胶原蛋白的表达产生显著影响,在此期间比
生长速率过高或过低均不利于目标蛋白的合成,且最适比生长速率为0.04加.05
h~,发酵结束时细胞和类人胶原蛋白的浓度可分别达69.5g/L(DCW)和13.8
g/L口
3.最佳的发酵条件为:采用阶段式补氮方式;当溶氧低于20%(空气饱和
(DCW),类人胶原蛋白浓度为16.75
g/L。
对动力学模型的参数进行优化求解,结果表明动力学模型与实验值吻合良好。
在分批发酵阶段,动力学模型为
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在补料阶段(诱导前)的动力学模型为
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