2-甲基-3-甲氧基-4-苯基丁酸(MMPB)羧基衍生化测定藻毒素总量的研究.pdfVIP

S03-004 2-甲基-3-甲氧基-4-苯基丁酸（MMPB）羧基衍生化 测定藻毒素总量的研究 蔡倩，丁怡然，黎潇，展巨宏，潘学军* （昆明理工大学环境科学与工程学院昆明 650093 ） 微囊藻毒素 （Microcystins,MC ）是由导致蓝藻水华的主要藻种，如固氮的鱼腥藻、束丝 藻、拟柱胞藻、胶刺藻）和节球藻，非固氮的微囊藻、颤藻和鞘丝藻等暴发所产生的一种环 [1] 状肝毒素 ，它对蛋白磷酸酶 1 和蛋白磷酸酶 2A 具有抑制作用，因此与肿瘤促进作用有直 [2] 接关系 。MC 是一种单环七肽物质，由于多肽中两种可变氨基酸组成的不同，具有多种异 [3] 构体，MC 的毒性和其他结构相关，Adda 是表达 MC 毒性的必须集团 。因此，如果把藻毒 素的 Adda 基团氧化出来，检测氧化产物 MMPB ，将能更准确的评估藻毒素的风险。 本文以 N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺 （BSTFA ）为衍生化试剂，采用气相色谱-质谱联 用技术 （GC-MS ）对 MMPB 的羧基衍生化进行了研究，考察了反应溶液、衍生化试剂用量、 衍生化温度和时间对 MMPB 衍生化效果的影响，并对衍生化产物的稳定性、标准曲线、仪 器检出限进行了考察，解释了衍生化产物特征碎片离子的裂解机理。 研究结果表明：对于 100 uL 0.01g/L 标准溶液，用乙酸乙酯作为反应溶剂时，MMPB 的 衍生物色谱峰相对丰度比较高。根据空白对照，得到 MMPB-TMS 的出峰时间为 12.25min， 对照质谱图，MMPB-TMS 的碎片离子主要是m/z 73，91，135，145，189，204 （见图1）， 依据选择特征离子的原则，选取 m/z 91，145，189 作为 SIM 模式扫描的特征离子碎片。根 据峰面积变化，确定 BSTFA 的最佳用量为 30uL；衍生化过程不需要加热，常温下(20℃)下 反应 10 min 就可取得最佳的衍生化效果；衍生化产物的稳定性较好，在-20℃下放置 48 h ， 相对响应因子 RRF 基本没有降低。在优化的实验条件下，待测物具有良好的线性相关性， MMPB 的检出限为 0.0045ug ，按 MC 的平均分子量为 1 000 计算，故本方法对 MC 的检出 限为 0.0225ug 。 2013060304 #427 RT: 12.23 AV: 1 NL: 1.17E6 T: + c Full ms [50.00-650.00] 72.99 100 90 80 70 e c n 60 a d n u b A 50 e