不同来源食品级乳酸菌及双歧杆菌对乳酸链球菌素敏感性研究.pdfVIP

第 9卷 第 3期 中 国 食 品 学 报 Vo1．9 No．3 2009 年 6月 JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnol0gy Jun．2009 不同来源食品级乳酸茵及双歧杆菌对乳酸链球菌素 敏感性的研究 马乐辉 田洪涛 张丽芳 郭兴华 罗云波 ， (河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001 中国科学院微生物研究所 北京 100080 中国农业大学食 品科技与营养工程学院 北京 100083) 摘要 目的 ：研 究不同来源的食 品级乳 酸菌和双歧杆菌对乳酸链球 茵素 (nisin)的敏 感性 ，为构建 以nisin作为 食品级筛选标记的受体乳酸茵表达系统以及筛选食品发酵、保鲜与贮藏过程 中的nisin抗性乳酸茵提供科学依 据。方法：采用试管稀释法研 究不 同来源的食品级的 l8株乳酸球菌、l5株乳酸杆菌和 5株双歧杆菌对 nisin的 敏感性。结果 ：大部分乳球菌和部分乳杆菌对 nisin不敏感 。但乳酸乳球菌(Laetococcusloc廊)ML0230、99210，肠 膜明串殊茵葡聚糖亚种 (Leuconostocmesenteroidessubspdextranicum)AS 1．2141。嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)La1，德 氏乳杆 菌保加利亚亚种 (Lactobacillusdelbrueckiisubsp bulgaricus)S一1、DR、LD、AS 1．2625，长双歧杆菌(Bifidobactedum longum)Blm对 nisin非常敏感，在 nisin质量浓度为 5I．zgm／L(IU／mL)时即可 抑制其生长。结论 ：初步 筛选 出17株 以nisin作 为食品级 筛选标记的受体乳酸菌 ，同时筛选 出21株食 品发酵、 保鲜与贮藏过程 中的nisin抗性乳酸茵 关键词 敏感性 乳酸链球菌素 乳酸茵 双歧杆菌 最低抑茵浓度 (MIC) 文章编号 1009—7848(2009)03—0026—07 乳酸菌和双歧杆菌的益生功能 已被公认 。目 们是乳酸菌食品级表达系统研究的重点和代表 。 前 ，乳酸菌和双歧杆菌的研究 已深入到分子生物 构建 以nisin为筛选标记的食品级乳酸菌表达系 学和基因工程阶段 ．益生菌食品级表达系统的研 统 ．不需要构建缺陷型菌株 ，只需筛选 出nisin敏 究成为乳酸菌基因工程的前沿和热点。现阶段大 感型菌株 ，使乳酸菌的基 因工程操作简易、快速 、 部分乳酸菌基因工程菌是抗生素 (如红霉素 、氯霉 高效。 素)抗性 的，虽然这对载体的选择作用和筛选转化 经乳酸菌发酵 的乳制品、肉制品、果蔬制 品、 子是有效的，但将抗生素抗性基因投放到环境 中 豆类制品和谷物制品在保鲜和贮藏过程中，为抑 或人和动物体内．由于抗性因子的转移，会给生物 制杂菌污染 ，通常采用高盐 、低 pH值或化学及生 安全性带来严重危害。为了防止使用抗生素抗性 物防腐剂等手段 。nisin是唯一国际公认 的生物防 标记带来的危害，采用对人体安全的食品级标记 腐剂 ．在乳酸菌发酵和贮藏过程中能有效抑制革 (如 nisin、蜜二糖)替代抗生素抗性标记 ，以构建 兰氏阳性 (G)杂菌 ，同时也抑制同源性较高的乳 食品级乳酸菌受体／载体系统。在食品级表达系统 酸菌。为使nisin与乳酸菌能够 同时应用于食 品发 中．乳酸链球菌素 (nisin)抗性基因nsrt-61或免疫性 酵工业 ．本文采用试管稀释法f81，对不同来源的食 基 因nisIm作为食品级选择标记得到广泛应用 ，它 品级 的 l8株乳酸乳球菌 、l5株乳酸