应用蛋白质组学技术对寄生压力下缢蛏血淋巴抗性的研究.pdfVIP

海 　洋 　湖 　沼 　通 　报 2004 年 Transactions of Oceanology and Limnology No. 2 ( ) 文章编号 2004 应用蛋白质组学技术对寄生压力下 缢蛏血淋巴的抗性研究 1 2 3 张 　鹭 ,彭宣宪 ,陈寅山 ( 1. 齐齐哈尔大学生命科学院 ,黑龙江 齐齐哈尔 ,161005 ;2. 厦门大学生命科学院 ,厦门 361005 ; 3. 福建师范大学生物工程学院 ,福建 福州 350007) ( ) 摘要 : 以闽、浙一带重要的海产养殖贝类缢蛏 Sinonovacula constricta Lamarck 为研究对象 ,应用 蛋白质组学方法探求其在受寄生压力下血淋巴内40KDa 以下小分子蛋白质组的变化,寻找缢 蛏血淋巴的抗性机制 ,明确血淋巴在机体防御体系中的作用。在寄生压力下 ,缢蛏血淋巴内 有多种蛋白发生变化 ,包括生长调节蛋白 ,金属硫蛋白B , 唾液酸结合凝集素 ,凝血因子 IXA 轻链等 ,涉及多种与炎症反应 ,神经营养 ,基因表达调控 ,蛋白质合成等有关的功能。说明血 淋巴在缢蛏的防御体系中具有关键性作用。 关键词 :蛋白质组 ;缢蛏 ;血淋巴 ;寄生 ;小分子蛋白质 中图分类号 :Q51 　　　　文献标识码 :A ( ) 缢蛏 Sinonovacula constricta Lamarck 属软体动物门、瓣鳃纲、真瓣鳃目、海螂亚目。生活在 河口附近 ,港湾沿岸潮间带的滩涂洞穴内 ,历来是我国沿海重要的经济养殖贝类。尤以福建、 浙江两省缢蛏养殖最为发达 ,在该地区贝类养殖业中占有相当重要的地位。然而 ,各种病害严 重阻碍了缢蛏养殖业的发展 ,其中缢蛏寄生虫病害对缢蛏的危害最为严重。可以令缢蛏外套 膜变成黄褐色 ,蛏体消瘦至死亡 ,俗称“黑根病”。1975 年 ,我国学者唐崇惕等在对福建省九龙 江口缢蛏养殖地缢蛏寄生虫病害的调查中发现 , 缢蛏体内的寄生虫主要是食蛏泄肠吸虫 ( Vesicocoelium solenophagum ) 幼虫 ,其后陆续有报道对这一现象进行研究 ,但多集中在食蛏泄肠 吸虫病原生物学及病理学的研究上[12 ] 。而缢蛏受寄生侵染后其血淋巴蛋白的变化情况则从 未见报道。近年来蛋白质组技术的发展为在蛋白质水平来分析多种分子机理提供了很大的便 利 , 目前已成为后基因组时代的标志性技术,广泛用于生物医学及制药领域。本课题应用蛋白 质组学方法 , 以缢蛏血淋巴作为研究对象,着重探查其在寄生压力下的小分子差异蛋白表达 , 并进行初步鉴定 ,从而推测缢蛏血淋巴的抗性机制 ,并为这些蛋白的进一步纯化、鉴定和克隆 提供基础资料。 2 　材料和方法 2 . 1 　材料来源 本研究所用缢蛏均购自厦门市营平农贸市场 ,采自福建省龙海市蛏埕。湿重约 15g ,体长 ( ) 第一作者简介 :张　鹭 1970 毕业于福建师范大学 ,硕士 ,从事无脊椎动物研究。 收稿日期 © 1994-2006 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 2 期 　　　　　　　　　应用蛋白质组学技术对寄生压力下缢蛏血淋巴的抗性研究 81 5～6cm ,长宽比约 3 ∶1 。 2 . 2 　血淋巴样品制备 横割闭壳肌 ,用 2mL 玻璃注射器和 9 号针头从缢蛏闭壳肌