发酵液的预处理和固液分离设备.docVIP

第八章 发酵液的预处理和固液分离设备 第一节 发酵液的预处理 生物工业生产中的培养基和发酵液，由于高黏度、非牛顿性、菌体细小且可压缩，若不经过适当的预处理就很难实现工业规模的过滤，由于菌体自溶释放出的核酸及其他有机物质的存在会造成液体浑浊，即使采用高速离心机也难以分离。还有一些发酵液中，高价无机离子(Ca2+、Mg2+、Fe2+)和杂蛋白质较多。高价无机离子的存在，在采用离子交换法提炼时，会影响树脂的交换容量。杂蛋白质的存在．在采用大网格树脂吸附法提炼时会降低其吸附能力，采用萃取法时容易产生乳化，使两相分离不清，采用过滤法时，过滤速度下降，过滤膜受到污染。发酵液预处理的目的在于增大悬浮液中固体颗粒的尺寸，除去高价无机离子和杂蛋白质，降低液体教度，实现有效分离。 一、加热 加热是发酵液预处理最简单且最常用的方法。加热能改善发酵液的操作特性。蛋白质从有规则排列变成不规则结构的过程称为变性，变性蛋白质的溶解度小。加热是蛋白质变性凝固的有效方法。如柠檬酸发酵液加热至80℃以上，可使蛋白质变性凝固、过滤速度加快，此外，加热能使发酵液黏度明显降低。液体黏度是温度的指数函数，升高温度是降低黏度的有效措施。 二、凝聚和絮凝 凝聚和絮凝技术能有效地改变细胞、菌体和蛋白质等固体粒子的分散状态，使之聚集、颗粒增大，便于分离，常用于细小茵体且鼓度较大的发酵液预处理中。凝聚是在中性盐作用下，由于双电层排斥电位的降低，而使胶体体系不稳定的过程。 三、加入盐类 发酵液中加入某些盐类，可除去高价无机离子。如除去钙离子，可加入草酸钠，反应生成的草酸钙能促进蛋白质凝固、提高溶液质量。除去镁离子，可加入三聚磷酸钠，它与镁离子形成不溶性络合物： 用磷酸盐处理，也能大大降低钙离子和镁离子的浓度。除去铁离子，可加入黄血盐．使其形成普鲁士蓝沉淀。 四、调节pH 蛋白质一般以胶体状态存在于发酵液中。胶体状态的稳定性与其所带电荷有关。蛋白质属两性物质，在酸性溶液中带正电荷，而在碱性溶液中带负电荷。某一pH下，净电荷为零，溶解度最小，称为等电点。由于羧基的电离度比氨基大，因而蛋白质的酸性通常强于碱性，其等电点大都在酸性范围内(pH4.0—5.0)，因此，调节发酵液的pH到蛋白质的等电点是除去蛋白质的有效方法。大幅度改变pH，还能使蛋白质变性凝固。 对于加入离子型絮凝剂的发酵液，调节pH可改变絮凝剂的电离度，从而改变分子链的伸展状态。电离度大，链节上相邻离子基团间的电排斥作用强，使分子链从卷曲状态变为伸展状态，则架桥能力提高。 五、加入助滤剂 在含有大量细小胶体粒子的发酵液中加入团体助滤剂，这些胶体粒子吸附于助滤剂微粒上，助滤剂就作为胶体粒子的载体，均匀地分布于滤饼层中，相应地改变了滤饼结构，降低了滤饼的可压缩性，也就减小了过滤阻力。目前生物工业中常用的助滤剂是硅藻土，其次是珍珠岩粉、活性炭、石英砂、石棉粉、纤维素、白土等。 第二节 细胞破碎设备 细胞破碎的方法很多，一般按是否使用外加力分为机械法和非机械法两类。非机械法有酶溶法、化学法、物理法和干燥法等。在此我们对非机械法不作进一步讨论，下面介绍一下机械法中常用的细胞破碎设备。 （一）高速珠磨机 珠磨机的工作原理是将进入珠磨机的细胞悬浮液与极细的玻璃珠一起搅拌，由于研磨作用，使细胞破碎，释放出内含物。图8-1为水平搅拌式珠磨机结构示意图。 如图8-1所示在水平位置的磨室内放置玻璃小珠，装在圆心轴上的圆盘搅拌器高速旋转，使细胞悬浮液和玻璃小珠相互搅拌，在液面出口处，旋转圆盘和出口平板之间的狭缝很小，可阻挡玻璃小珠。从而在珠液分离器的协助下，珠子被挡在破碎室内，而浆液则流出，从而实现连续操作。由于珠磨破碎过程要产生热量，易造成某些活性物质的失活，一般在磨室装有夹套冷却装置。 （二）高压匀浆器 高压匀浆器是用作细胞破碎的较好的设备。它是由可产生高压的正向排代泵和排出阀组成。高压匀浆器的排出阀简图如图8-2所示。 细胞浆液通过止逆阀进入泵内，利用高压使其在排出阀的小孔冲击，并且高速撞击在撞击环上。细胞在这一系列的高速运动中经历了剪切、碰撞以及高压到常压的变化，从而造成细胞破裂。 在操作方式上，可以采用单次通过匀浆器或多次循环通过等方式。对某些较难破碎的细胞如小球菌、链球菌、酵母菌和乳酸杆菌等，应采用多次循环的方式才能达到较高的破碎率。 （三）超声波振荡器 超声波具有频率高、波长短、定向传播等特点，通常在15～25KHz的频率下操作。超声波振荡器有不同的类型，常用的为电声型，它是由发声器和换能器组成，发生器能产生高频电流，换能器的作用是把电磁振荡转换成机械振动。超声波振荡器又可分为槽式和探头直接插入介质两种型式，一般破碎效果后者比前者好。 超声波对细胞的破碎作用与液体中空穴的形成有关。Douiash指出当超声波在液体中