尼古丁对牙周韧带成纤维细胞凋亡影响.pdf

竺坐坠坐!!!型竺竺她竺卿些型堕翌型!唑!!坐螋堡!业生塑型型塑-2· 尼古丁对人牙周韧带成纤维细胞凋亡的影响 研究生：赢丽 导师：支{j琪 (遵义医学院附属口腔医院口腔内科教研室) 摘 要 目的：研究尼古丁(nicotine)对体外培养的人牙周韧带成纤维细胞 fibroblasts，PDLFs)的影响、尼古丁能否诱导人牙周 (periodontal ligament 韧带成纤维细胞凋亡，以及凋亡相关基医Fas在尼古丁诱导的人牙周韧带 成纤维细胞凋亡中的表达情况。探讨尼古丁作为致病因素在牙周病中的致 病机理。方法：采用组织块培养法培养原代人牙周韧带成纤维细胞并传代 取处于对数生长期的第6代细胞用于实验，不同浓度的尼古丁分别于不同 时间(24h、48h、72h)处理第6代牙周膜成纤维细胞，通过四唑盐比色 泫(MTT法)、流式细胞仪(Flow Cytometer,FCM)及免疫组织化学染色 法研究尼古丁对人牙周韧带成纤维细胞的抑制作用、尼古丁对人牙周韧带 成纤维细胞凋亡的影响及其中凋亡相关蛋白Fas的表达情况。结果：四唑 盐比色法证实尼古丁对人牙周韧带成纤维细胞的生长有抑制作用，延长药 物作用时间及增加药物浓度均会增强其对细胞的抑制作用；流式细胞仪 DNA含量分析及碣亡率测定均显示尼古丁可以诱导体外培养的入牙周韧 带成纤维细胞凋亡；免疫细胞组织化学染色法证实尼古丁作用于人牙周韧 带成纤维细胞后，胞膜中Fas／Apo—l(CD95)抗原呈阳性表达。结论：l、尼 古丁可以抑制牙周韧带成纤维细胞的生长．对人牙周韧带成纤维细胞有一 定的毒性作用，在牙周病的发展过程中可能加重了牙周膜的破坏程度。2、 尼古丁能够诱导入牙羁韧带成纤维细胞凋亡。说明尼古丁可能通过细胞粥 亡这一途径加重牙周病的发展。3、经尼古丁作用的人牙周韧带成纤维细 胞，其胞桨中Fas／Apo．1(CD95)表达呈阳性，说明Fas／FasL系统可能参与 了尼古丁对牙周韧带成纤维细胞il爿亡的调节。 关键词；尼古丁；牙周韧带成纤维细胞；细胞凋亡；Fas／Apo一1(0D95) 抗原：细胞培养；MTT法；流武缨胞仪；免疫组织化学染色法 ．笙苎：丝壹!型查竺望望堂壁堑堡塑些塑!：塑堑堕!竖!兰竺! ．3． Effects ofni coti Reonhuman iodontaI per I fibroblasts igament invitro apoptosiS GAO LIU Postgraduate：Li Supervisor：Qi ofOral of Department Medical Medicine，HospitalStomatology,Zunyi College ZunYi Province563003 City,Guizhou Abstract aimofthis wasto Objectiyes：The