吴茱萸RAPD体系构建及道地性遗传背景研究.pdfVIP

药用植物化学与中药资源可持续发展学术研讨会 吴茱萸RAPD体系构建及道地性遗传背景研究 曹 亮1，李顺祥1’扭，魏宝阳3，黄丹1，徐菲1，佟志远1 (1湖南中医药大学药学院，湖南长沙410208，中国；2湖南中医药研究院中药研究所，湖南长 沙410006，中国；3．湖南农业大学生物科学技术学院，湖南长沙410128，中国) 【摘要】目的：建立探讨吴茱萸的道地性的分子标记技术。方法：应用改良cTAB法提取吴茱 萸基因组DNA；构建RAPD反应体系，并从引物浓度、模板浓度、酶量、dNTP量四个方面改良反应 体系；对全国三个省市五个吴茱萸产区采取的样品进行RAPD分子标记，应用NTSYS—PC软件进行聚 类分析，构建遗传发生树。结果；建立了优化的DNA提取方法；获得改良的RAPD反应体系(25此) 为：模板45 U，dNTP量7．5 ng，引物量15pM，酶1．25 pM；对RAPD扩增结果进行聚类分析发现在相 似度系数为O．78时，铜仁、浏阳、建德、温州的吴茱萸能各自聚集在相同地域的族群，不同品种吴 茱萸差异较大，浏刚地区的吴茱萸和石虎在相似度系数为0．68时聚集为两个类群。结论：研究发