06级研究生班分子生物学期终考试试卷(A卷)标准答案.docVIP

06级分子生物学试卷 (A卷)RNA干涉技术是指由短的双链RNA诱导的同源RNA降解的过程，可使基因的表达受到抑制。它是在基因的转录后水平抑制基因表达的一种研究基因功能的方法。 4、基因定点诱变：指将基因的某一个或某些位点进行人工替换或删除的过程,称为基因定点诱变. 5、错义突变：指DNA分子中碱基的取代，经转录产生的mRNA后，相应密码子发生改变，编码另一种氨基酸，使蛋白质中的氨基酸组成和排列顺序发生改变。 6、转基因技术是指将外源基因导入受精卵细胞或胚胎干细胞中，通过外源基因与细胞染色体DNA之间随机重组的发生而将外源基因插入到受体细胞染色体DNA上的过程。 二．填空题：每空1分，共25分 获得启动子、增强子；基因易位；原癌基因扩增；点突变 同义突变；错义突变；无义突变；移码突变 限制性片段长度多态性；微卫星序列；单核苷酸多态性 一条多肽链；编码序列；两侧的侧翼序列；插入序列 基因添加（增补）； 基因干预； 基因置换 ；导入自杀基因； 基因修饰 点突变；DNA多态性 旁观者效应 核酸分子杂交；PCR技术 三.单项选择题 (每题分,共分.)1、转座引起插入突变（1分） 当插入序列或转座子插入某个基因的操纵序列前时，可引起操纵子后的结构基因表达失活。 2、转座可产生新基因（1分） 如果转座子上带有某些抗药性基因，它一方面会造成靶位点DNA突变，同时会使该位点产生抗药性。 3、转座可出现染色体畸变发生（1分） 当转座发生在宿主DNA原有位点时，往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组，引起DNA的缺失或倒位。 4、转座可以引起生物进化（1分） 由于转座作用，使一些原来在染色体上相距甚远的基因组合到一起，构建成一个操纵子或表达单元，也可能产生上些具有新的生物学功能的基因和新的蛋白质分子。 二、真核生物基因组结构与功能特点（6分）：每点1分 1、每一种真核生物都有一定的染色体数目，除了配子为单倍体外，体细胞一般为双倍体。而原核生物为单倍体。 2、真核基因组远远大于原核生物基因组，结构复杂，基因数多。具有多个复制起始点。 3、真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体,储存于核内。 4、真核生物中含有大量的重复序列。 5、真核生物基因组内非编码序列占90%以上。基因组中非编码序列所占比例是真核生物与细菌、病毒的重要区别，且在一定程度上也是生物进化的标尺。 6、真核基因是断裂基因，即编码序列被非编码序列分隔开。 三、比较原核表达系统与真核表达系统各自优缺点（8分） 原核表达系统优点：（2分） 1 遗传背景清楚，易于遗传操作； 2 蛋白表达水平高; 3 生长快, 培养条件要求较低; 原核系统缺陷：（2分） 没有真核转录后加工的功能，不能进行mRNA的剪接，所以只能表达cDNA而不能表达真核的基因组基因； 没有真核翻译后加工的功能，表达产生的蛋白质，不能进行糖基化、磷酸化等修饰，难以形成正确的二硫键配对和空间构像折叠，因而产生的蛋白质常没有足够的生物学活性； 表达的蛋白质经常是不溶的，会在细菌内聚集成包涵体（inclusiion body），尤其当表达目的蛋白量超过细菌体总蛋白量10%时，就很容易形成包涵体。 利用真核细胞作宿主表达系统的优点是：（2分） ① 真核细胞能够识别和除去外源基因中的内含子，剪接加工形成成熟的mRNA。 ② 真核细胞将表达的蛋白糖基化，而大肠杆菌表达的蛋白是没有糖基化的，糖基化对某些表达蛋白的免疫原性影响很大。 真核细胞作宿主表达系统尚存在以下几个问题：（2分） ① 选择标记及选择系统只有少数几个； ② 转化效率低，一般只有10-6～10-4； ③ 外源基因转移并整合到细胞染色体DNA上带有一定的自发性和盲目性，整合的拷贝数和位置都还不能控制； ④ 细胞培养及细胞的挑选要求比较高，手续繁琐费时。此外，细胞大量培养还有不少问题，而且成本较高，利用培养细胞方式大量生产某些表达蛋白，从工艺到成本都要很好地考虑。 四、基因点突变的基因诊断方法及原理（不少于四种方法）（8分）：每点2分 1、采用PCR产物的限制性片段长度多态性分析 PCR－RFLP就是利用PCR技术先将包含待测位点的DNA片段扩增出来，然后用识别该位点的限制性内切酶水解，根据限制性片段数量和长度作出诊断。 2、采用PCR结合等位基因特异性寡核苷酸探针杂交技术 针对已知突变位点的基因，可以分别针对已知突变位点的序列，设计一对寡核苷酸探针，其中一条为野生型探针，与无突变序列互补，另一个为突变型探针，与突变序列互补。同时设计探针时，突变碱基应位于探针的中央，这样在严格控制杂交和洗脱条件下，只有完全互补的探针保留下来，形成稳定杂交分子，而中央碱基与靶序列不匹配的探针则被洗脱。 3、PCR产物的反相点杂交分析技术 此项