第3节 酶工程.pptVIP

第３节　酶工程 一、酶的特性 酶是由活细胞产生的具有特殊催化 功能的一类蛋白质。其特点： ①催化效率高 ②专一性强 ③反应条件温和 ④催化活性受到调节和控制 二、酶工程简介 １.概念：酶工程是酶学和工程学相互渗透结合发展而形成一门新的技术学科。它是从应用的目的出发研究酶、应用酶的特异性催化功能，并通过工程化将相应原料转化成有用物质的技术。 (二)酶的分离与提纯 1、细胞破碎处理 机械破碎法：利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。 物理破碎法：利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。 化学破碎法：利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜，使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变。 酶学破碎法：选用合适的酶，使细胞壁遭到破坏，进而在低渗溶液中将原生质体破碎。 注意：酶的纯度要求！ ⑴载体结合法 是将细胞悬液直接与水不溶性的 载体 相结合的固定化方法。包括物理吸附法、离子结合法、共价结合法。 ⑵包埋法 将酶包裹在多孔的载体中或凝胶网格内的技术（网络型和微囊型）。 五、酶的应用 1.应用范畴 固定化细胞的制备 ⒈固定化细胞的定义 将细胞限制或定位于特定空间位 置的方法称为细胞固定化技术。 被限制或定位于特定空间位置的 细胞称为固定化细胞。 ⒉固定化细胞的特点 有细胞特性，生物催化剂功能， 固相催化剂特点。 优点： ①无须进行酶的分离纯化 ②保持酶的原始状态，酶回收 率高③比固定化酶稳定性高 ④细胞内酶附助因子可再生 ⑤细胞本身含多酶体系 ⑥抗污染能力强 酶的工作效率很高， α-淀粉酶在60℃ 15分钟可使两吨淀粉转化为糊精，若用酸水解须在14O～15O℃高温耐酸设备中至少进行2小时。 目前，人们把酶工程分为生物酶工程和化学酶工程。 * ２.主要内容：①酶的生产②分离和纯化③酶的固定化④酶及固定化酶的反应器⑤酶与固定化酶的应用 提取法、发酵法和化学合成法 1、提取法：直接从动植物或微生物的细胞或组织中将酶提取出来。 2、发酵法： 通过微生物发酵来获得人们所需要的酶。 3、化学合成法：采用化学合成的方法获得酶。但是，成本比较高，并且只能合成已知化学结构的酶。 （一）酶的生产? 三、酶的生产与提纯 3 、酶的提取 ①改变PH值法（酸碱溶液）②盐溶液提取法③有机溶剂提取法等 ４ 、提纯 酶分离纯化的方法很多，可利用酶相对分子质量的大小进行分离纯化，如通过透析的方法分离酶等。 2 、过滤滤液 5、冷冻结晶酶蛋白 6、酶制剂 四、酶的固定化技术 ⑶交联法 用多功能试剂对细胞进行交联的固定化方法（交联法使用的交联剂是戊二醛等水溶性化合物）。 ⑷无载体法 靠细胞自身的絮凝作用制备固定化细胞的技术。 工业方面 医药方面 环保方面 分析检测 酶工程的应用主要集中于食品工业、轻工业、医药工业和临床诊断等方面。 对传统化学工业的改造和“三废”处理等具有很大潜力。 生物体——机器——酶——复杂高效化学反应。 胃分泌的胃蛋白酶胰脏分泌的淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶 第三节 酶工程（P112） ? ? 一、酶工程的概念和内容 二、酶分析技术 三、酶的生产 四、酶的提取和分离纯化 五、酶的固定化方法 六、酶的应用? 生物体就象是一部十分复杂的机器，在生物体内维持复杂化学反应高效进行的原因，主要在于生物细胞内具有一系列能催化生物反应的特殊蛋白质——酶。生物体内有许多酶，每种酶各尽其职，催化专一的化学反应。我们每天吃的米饭、鸡蛋、肉类等的食物都必须在胃分泌的胃蛋白酶和胰脏分泌的淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶等的作用下，分解成葡萄糖、氨基酸、脂肪酸和甘油等小分子，才能透过小肠壁，被组织吸收和利用；人体生长的时候，体内又会进行各种蛋白质、脂肪等的合成反应，这些合成反应也需要在酶的催化下完成。在生物体内进行的各种化学反应，几乎都需要在酶的催化下才能顺利地完成。一旦酶的正常催化作用遭到干扰破坏，轻则会使生物体表现出某些症状，重则将危及生命。 酶是一种在生物体内具有新陈代谢催化剂作用的蛋白质。具有反应效率高、条件温和、反应产物污染小、能耗低和反应易控制等特点。 酶工程又称酶工艺学，就是利用酶的催化作用，利用酶或者微生物细胞，动植物细胞，细胞器等，通过工程学的手段，在一定的生物反应器中，将相应的原料转化成所需要的产品。 一、酶工程的概念和内容 主要任务是： (1)采用基因重组技术，利用微生物、动植物细胞作为生物反应器大量生产酶。目前已成功地生产了 lOO多种酶。 (2)通过基因工程技术，使酶基因发生定位突变，产生遗传性修饰酶(突变酶)。 (3)设计新酶基因，合成自然界不曾有