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实时荧光定量PCR技术的研究 进展和应用 Dany 实时荧光定量PCR技术的研究进展和应用 实时荧光定量PCR的定义 实时荧光定量PCR的原理 实时荧光定量PCR的检测方法 实时荧光定量PCR的应用 实时荧光定量PCR的定义 实时荧光定量PCR即FQ-PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR)，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。比起传统的PCR技术，它具有以下的几大优点: ① 操作简便、快速高效、高通量 ，敏感性 、重复性和特异性高； ② 由于是在封闭的体系中完成扩增并进行实时测定，大大降低了污染的可能性并且无须在扩增后进行操作 ； ③有很大 的动力学范同 ，可以在很大浓度范 围内(l0 倍)进行定量； ④ 既可以做定量分析又可以做定性分析； ⑤ 它还可以通过不同的引物设计在同一反应体系中同时对多个靶基因分子进行扩增，即多重扩增。 实时荧光定量 PCR技术发明至今 ，人们利用实时荧光定量PCR技术本身的优越性把其广泛运用于医学诊断 、海关检验检疫、国防军事、新型农业 、基础研究等领域。尤其在动物医学病理和分子生物学研究领域应 用十分广泛。 FQ-PCR的原理 实时荧光定量 PCR的原理是以荧