pSecTag-EGFP真核表达载体的构建及其转染鸡胚胎成纤维细胞的研究论文.pdfVIP

华东地区第十届实验动物科学学术交流会 25 pSecTag．EGFP真核表达载体的构建及其 转染鸡胚胎成纤维细胞的研究 朱靖1，窦如海1，金东庆1，杨娜娜z (1．山东省实验动物中心，济南250002；2．泰山医学院。泰安271016) 【摘要】 目的研究pSecTag真核表达载体转染鸡胚胎成纤维细胞的转染效率，选出该质粒转染 鸡胚胎成纤维细胞的最佳转染条件，从而为研究目的基因在鸡胚胎成纤维细胞中成功表达奠定基 分泌型真核表达载体，设计优化试验，通过脂质体介导的方法转染鸡胚胎成纤维细胞，用Bradford 检测法检测正交优化不同组合细胞培养液中所表达分泌的增强绿色荧光蛋白的相对含量。结果成 功构建pSecTag．EGFP分泌型真核表达载体，并选出该质粒转染鸡胚胎成纤维细胞的最佳转染条 脂质体介导的方法能有效转染鸡胚胎成纤维细胞。 件，即脂质体加2“l、质粒加1．0岖。结论 [关键词】鸡胚胎成纤维细胞；EGF