大麦茎尖农杆菌介导转化.doc

评阅意见 大麦是世界上种植面积和产量仅次于小麦、水稻和玉米的重要作物，不仅用做粮食和饲料，也是酿造啤酒的主要原料，因此大麦品种遗传改良研究一直倍受重视。农杆菌介导根癌农杆菌介导的大麦茎尖转化研究 黎冬华12 廖玉才3　李和平12＊ （华中农业大学麦类作物分子生物技术实验武汉 430070 华中农业大学生命科学技术学院武汉 430070 华中农业大学植物科学技术学院武汉 430070） 经株angiliao@mail.hzau.edu.cn摘 要 为了建立农杆菌介导的大麦茎尖遗传转化技术，本研究以我国大麦主推品种鄂大麦9号、鄂大麦32122为材料，以农杆菌介导法转化大麦茎尖，经PPT筛选获得了转除草剂基因的大麦株系。PCR鉴定表明，以鄂大麦9号茎尖为受体，筛选获得4个转基因植株，阳性率为0.59%；以鄂大麦32122茎尖为受体，筛选获得了10个阳性植株，阳性率为1.96%。转基因T1代Southern杂交分析证实，外源基因确已整合到大麦基因组中，已鉴定的转基因株系均含单个转基因拷贝，不同转基因株系整合的位点不同。因此大麦茎尖可作为农杆菌转化的受体。这些研究结果为拓宽大麦遗传转化受体提供了技术和方法。 关键词大麦；茎尖；农杆菌介导的转化 Transformation of shoot apical meristems of elite barley cultivars via Agrobacterium-mediated transformation LI Donghua1,2, LIAO Yucai1,3, LI Heping1,2* （1. MolecularBiotechnology Laboratory of Triticeae Crops, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, PR China 2. College of Life Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, PR China 3. College of Plant Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, PR China） Abstract：To develop a method for transformation of barley shoot apex through Agrobacterium-mediated strategy, two elite barley cultivars from China were used the transformation with their shoot apexes as explants. After selection on PPT media, transgenic lines resistant to herbicide were obtained. PCR identification showed that 基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金（20070504010）和转基因专项（2009Z）。 作者简介：黎华，硕士，植物生物技术email: ldh360681@webmail.hzau.edu.cn 通讯作者：李和平，教授，email: hepingli@mail.hzau.edu.cn four transgenic lines derived from the cultivar E-damai9, and ten transgenic lines from the cultivar E-damai32122 contained expected transgenes, with a transformation efficiency of 0.59% (E-damai9) and 1.96% (E-damai32122), respectively. Southern blot analysis of T1 transgenic lines demonstrated that foreign genes were indeed integrated into the barley genome. From the analyzed transgenic lines, it is clear