高中生物同步课件：1.3 测定微生物数量(中图版选修1).ppt

2.注意无菌操作 (1)建立无菌观念，严格控制实验器材、实验室、实验操作者的消毒、灭菌。 (2)整个实验过程必须保证无菌操作。 (3)取样、稀释都要在酒精灯火焰附近的无菌环境中进行。 (4)规范操作，防止其他微生物污染，实验结束后洗手、消毒。 3.准确计数 (1)在计算结果时，不同的微生物要选择的稀释倍数不同。细菌、放线菌、酵母菌一般以每个培养皿中有30～300个菌落为宜，而霉菌则以有10～100个为宜。 (2)要设置3个或3个以上的重复组，然后求其平均值进行计算。 (3)每隔24 h统计一次，最后选取数目稳定时的记录作为结果。 特别提醒　①间接计数法主要是用来推测样品中大约含有的活菌数。 ②统计的菌落数往往比实际的数目低，因为当两个或两个以上微生物在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有(　　) ①由于土样不同　②由于培养基污染　③由于操作失误　④没有设置对照 A．①②③　　　　　　　B．①②③④ C．②③④ D．①③④ 例2 【解析】　实验结论是否正确与是否设置对照有直接关系，但实验结果与是否设计对照无关。 【答案】　A 变式训练 下列调查活动或实验中，计算所得数值与实际数值相比，可能偏小的是(　　) ①标志重捕法调查灰喜鹊种群密度时标志物脱落 ②用血球计数板计数酵母菌数量时只统计方格内菌体 ③样方法调查蒲公英种群密度时在分布较密的地区取样 ④调查某遗传病的发病率时以患者家系为调查对象 A．①② B．② C．①③ D．②④ 栏目导引 新知初探思维启动 要点突破讲练互动 知能演练轻巧夺冠 第一章　 微生物培养技术 第3节　测定微生物的数量 学习导航 1.概述微生物计数的基本方法。 2.运用稀释平板法测定样品中微生物的数量。[重、难点] 新知初探思维启动 一、直接计数法 1.常用方法：显微镜直接计数法。 2.具体步骤：将待测样品制成悬液→取一定量的悬液放在显微镜下进行计数→观察并计算出单位体积内的微生物总数。 3.优点 4.缺点：难以计数______的细菌。 5.适用范围：一般适用于纯培养悬浮液中各种____________的计数。 二、间接计数法 1.常用方法：________________。 所需设备_____，可迅速得到结果 能观察到微生物的__________ 简单 形态特征 微小 单细胞菌体 稀释平板计数法 2.具体步骤：需要将待测样品配制成均匀的____________并使其均匀分布于平板中的培养基内，经过培养后，统计培养基中出现的________,即可推算出检测样品中的活菌数。 3.优点：在样品中含菌数_______的情形下也可以完成计数。 系列稀释液 菌落数 较少 判一判 (1)在用直接计数法测量培养瓶中酵母菌时，应在培养液静置一段时间后，从瓶底部吸取液体样本。(×) (2)用稀释平板计数法，通过观察菌落，得出的数值往往比实验值要大。(×) (3)在计数时，用于培养的器皿要进行灭菌。(√) 三、间接计数法实例 1.土壤中好气性细菌的计数 (1)制备土壤稀释液 取土壤表层_____________处的土样。准确称取1 g土样，放入盛有___ mL无菌水的锥形瓶中，振荡20 min后制成102倍的稀释液。然后进行系列稀释，得到103、104、105、106的系列稀释菌液。 5 cm～10 cm 99 (2)取样及倒平板：每个号码设置__个重复。 (3)培养。 (4)观察记录 ①计数时对于细菌、放线菌、酵母菌以每个培养皿内有__________个菌落为宜。霉菌以每个培养皿内有__________个菌落为宜。 3 30～300 10～100 2.检测天然水源中细菌总数和大肠菌群数 (1)细菌总数通常是指1 g或1 mL检测样品中所含__________的总数,单位用cfu/g(mL)表示。 细菌菌落 (2)大肠菌群数通常是指每100 g或100 mL检测样品中所含大肠菌群的实验数值，以(MPN)表示。大肠菌群是指在____℃条件下，24 h内能发酵______，产酸产气的一类___氧或_______氧型革兰氏阴性无芽孢杆菌的总称。大肠菌群数的检测，常用__________法，使用乳糖胆盐蛋白胨培养基、___________琼脂培养基(EMB培养基)和乳糖发酵管。 37 乳糖 需 兼性厌 多管发酵 伊红－美蓝 3.土壤中分解尿素细菌的计数 有些细菌含有__________酶，能将尿素琼脂培养基中的尿素分解生成氨