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血水草生物碱提取工艺的研究
黄松,徐治嚣,刘韶,挂方麓
(湖南中医学院,长沙410004)
斑水草系罂粟科白属菜族血水草属多年生革本植物(Eo/necon曲ionanthaHance),是我国独
属、独种的特有物种,广泛分布于我因浙江、江西、四川、湖南等南方各省区,根及根茎入药.‘中
药恚》记载其噱蔷、性寒、骞夺毒。具有清热勰毒之功效。民阔用来治疗急性结瑟炎,鼹绩膜炎、
究证明舡水草中生物碱能抗菌、抗微管蛋白聚合、抗PKC等抗癌作用。而提取工艺未见报道,我们
以白屈菜红碱为含量指标,正交实验法优选其提取工艺的最佳条件,从而为实现血水草生物碱的生
产提供萋;}学依据。
1仪器与材料
1.圭材耪及试制
药材为罄粟科自屈菜族血水草属斑水草的千燥根及根鉴,由湖南中医药研究院药谢昭明副研究
员鉴定.
鑫屈菜红碱对照品(供含量测定用):润鬻中医学院檀佬教爨室提供;
所用试剂均为AR级。’
1.2仪器
4000
旋转真空薄膜蒸发仪(日本)
KQ530DB速控超声清洗仪(江苏昆由)
2血水草中总生物碱的含量测定
2.王标准溶液鳇期备
溶液。
2.2标准曲线的制备
l、100IIl、150lll、200
分别精密吸取标准液50p
g-22.25
白屈菜红碱取样最(1lg)(X)进行线性回归,求出回归方穰。结果发现白屈菜红碱在4.45ll
肛g范围内呈良好线性关系,得回归方程Y=O.0383X+0.0634:r=0.9999。
2。3样品液翡糕备与测定
准确称取血水草细粉5.009,置于索氏提取器中用300ral95%EtOH回流提取4hr,提取液定溶
定吸收值(ABS),根据新溅得的各样品滚麓吸收僮与穗应麓取样董求鑫符测样燕滚酶浓瘦,骇蛊弱
菜红碱计求得血水草中总生物碱的百分含量。测得结果为2.14%。
198
3提取备因素单项试验的考察
3.1 幂麓浓度醇的考察
5h,
’警符三赞,提取滚凄95%EtOH定窖予50ml窖量藐孛,再精密移取25gl怒95%EtOH定窭予5ml客耋
瓶中,予283n=波长簸灏定吸收值A值。结果冤表l。
表l苓辩激度募总生物碱漫出率袭
戆生物碱浸窭搴(蒜);慧生魏碱重/矗永攀纲羚耋(g/g)
实验结果表明:醇浓度越高总生物碱浸出率也越高,故选择95%Et0H作为提取溶媒,与文献报
道粳同。
3.2提取鲢溺穗考察
准确称敬血水攀缨耪2。009,耋取8B¥量95%Et0H麟流提取兰次,撼墩黠阕势掰隽2.赫,差.繇、
定容于5ml容量瓶中,予283nm波长鲢溅定吸收德A僚。提取液量予予燥至恒重熬蒸发翌孛,浓缩
至于,乎减压干燥器中80℃干燥至恒熏,泓漫膏得率。
实验结果表骥:摄取辩闽为2。Ohr萼l。5hr戆慧生物碱漫澎羹襄漫缴率驳及浸誊褥率樱滗较均
耩有所点升,健都裰麓无凡,从节约辩簿穗人力、辘办方蓬考疼,选择提取王.5hr黄最佳提取对阕。
3.3提取溶媒倍量和提取次数的考察
实验结果表明:8BV、10BV量的提取溶媒对总生物碱浸如率最搿,6BY体积才熊将药材浸没。
但8BV霹10BV嚣慧生物碱熬浸凄率裰蓑无蔻,考虑节斑港媒量煮节瓣成奉方面考虑,溶嫌量选择
裙V、8BY。考虑蔓l对总生物碱的提取竞垒,提取次数在一、囊、三次中选择。
3.4菇交实验优选叔水草提取工艺奈件
3.4.1察验设计结合上述备因素酶考察结果释生产实际,选择溶媒萋,回流时溺,提取次数律蠢
考察因豢,设定三个水平,根据因素水平袭,选择正交表b(3‘)进行实验,以自屈菜红碱标示血水草总
燕糖碱麴浸出量荛措椽,萦井蹶牧洼测定含量。统计分耩,确定最佼麓滚提取工艺。
取,.趁热抽滤,滤液用95%Et0H定容予50ml容量瓶中得样晶液。
3。4。3血水草浸膏总生物碱含量的测定
长处测定吸收值(矗)
壹上述壹观分爨与方差分橛结果可知;以蛊水革总生
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