第十六章病毒病的分子生物学诊断.docVIP

第十六章 病毒病的分子生物学诊断 一、概述 二、病毒基因的克隆与鉴定 三、病毒基因探针的制备 (一)病毒基因探针的种类 (二)病毒基因探针的标记 四、核酸杂交检测技术 (一)建立杂交体系 (二)核酸打点杂交 (三)核酸酶保护分析法 (四)核酸原位杂交 五、PCR扩增技术 (一)诊断PCR技术的设计策略 (二) PCR用于DNA病毒的检测 (三)PCR用于RNA病毒的检测 (四)PCR用于分子流行病学研究 六、限制性内切酶图谱和寡核苷酸指纹图 (一)病毒基因组的限制性内切酶图谱 (二)病毒寡核苷酸指纹图(Oligonucleotide fingerprinting) 七、病毒核酸序列测定 一、概 述 近年来，随着分子生物学技术的飞速发展，尤其是分子遗传学的进步，大大提高了病毒病的诊断水平。病毒病的实验室诊断技术已从常规的病毒分离鉴定以及抗原和抗体的免疫学检测，进入到可对病毒基因序列和结构直接进行测定的分子生物学水平。病毒病的分子生物学诊断，包括对病毒核酸(DNA或RNA)和蛋白质等的测定，关键在于测定这些分子的特异序列或结构。病毒基因组往往含有特异序列，可以用核酸杂交的方法予以检出，而这段序列的存在则说明了该病毒的存在。 虽然病毒是严格细胞内寄生的最小、最简单的生命形式，但也具有与宿主细胞不同的独特的核酸序列和基因结构。常用的分子生物学诊断技术包括基因