量子点escence.pptVIP

量子点是一种由Ⅱ-Ⅵ族或Ⅲ-Ⅴ族元素组成的，粒径约为2-6nm，能够接受激发光产生荧光的半导体纳米微晶体，生物标记中最常用的是CdSe系列量子点。 这些独特的光学特性，使量子点成为一种最佳的荧光标记物应用于生物医学领域。 荧光强度高，是罗丹明6G的20倍。 荧光稳定，是罗丹明6G的100倍以上，耐光漂白。 颜色丰富，不同粒径大小的量子点具有不同的颜色，用同一波长的光可激发多种颜色的量子点，使多组份同时检测成为可能。 免疫组化、免疫荧光与量子点标记的免疫荧光检测的优缺点？ S-P法是目前国内使用最广泛的一种免疫酶法，由于它的敏感性强，效果好，背景清晰，无杂质而大受人们的欢迎。特点：敏感性较高，特异性强，应用范围广，节省时间，背景清晰，少非特异性染色，适合于照相及半永久保存。缺点：某些脏器存在内源性生物素干扰，streptavidin与核酸及细胞膜中磷脂有非特异反应，DAB显色有一定的致癌性等。 传统的免疫荧光染料存在诸多问题：1. 荧光容易漂白，制作好的切片不能长期保存，影响各种资料的积累；2. 激发和发射波长差不多，影响检测的敏感性，也很难与组织或细胞的自发荧光区分，故所作出的结论较主观；3. 发射波长比较宽，限制了用于多种信号的检测，而且不适合于石蜡包埋组织的检测等。 量子点与传统荧光染料相比，具有独特的光谱特征：1. 荧光稳定性好，耐光漂白；2. 荧光发射波长可控，激发光谱宽而连续、吸光系数大、荧光强度高；3. 荧光发射峰窄而对称、无长波拖尾、能实现一元激发多元发射等独特性能，可广泛应用于生物医学研究和临床诊断的荧光标记。并且，量子点免疫荧光检测的整个实验过程均不需要避光，结果能长期保存，国外报道可保存18个月，即使淬灭后，还可以继续加入量子点进行有效的恢复，从而有利于更好地进行定性、定量分析结果。 量子点的荧光寿命长 量子点标记的细胞和组织可长时间保存并保持和初次分析时相同水平的敏感度。最长的是18个月。 不同激发光可激发同一量子点 同一激发光可激发不同量子点 PCNA+CK PCNA+CK HER-2+ER They have adapted our established IHC protocols and have successfully multiplexed up to four QD markers. Quadruplex QD-IHC Sequential staining was performed using biotinylated antibodies and streptavidin-coated QDs QD-FISH 检测EBER在 鼻咽癌中的表达 QDs 能为多种标志物作定量分析。 The Nuance spectral imaging system supplied by Cambridge Research Instruments (CRI, Woburn, MA, USA) 上述这个系统能电子分离不同光谱或信号，特别是使组织的自发荧光与另外的荧光标志物分离。 量子点可适合用于活细胞的粘附、迁移、运动、形态及移植等长时示踪和功能研究，而不影响细胞的功能或形态。 由于QDs能长时间发射而不漂白的特点在共聚焦显微镜下可三维观察蛋白的表达。