COX-2mRNA在宫颈浸润性鳞癌和CINⅢ组织中表达及其临床意义.pdf

COX一2mRNA在宫颈浸润性鳞癌和 CIN llI组织中的表达及其临床意义 中文揍要 莉 ‘言 {害蹶癌是全球妇女中主簧死亡原因。在发晨串嚣家串是生育 年龄妇女的主耍死亡原因。尽管近年富颈癌翡发病率在下降，但 富颈癌黪五年垒存率却耦对较低，丽且小于50岁妇女兹发病率还 增加了10．3％，且黻每年3％的速度递增。年轻妇女富颈上交内 瘭样病交(Cervical intraepithelialneoplasia，CIN)亦成倍增攘。因 戴，寻找宫襞瘗早期诊断的基因指标及有效治疗宫颈癌的方法，迸 一步明确富颈癌发生、发浸的分子生耪学枕制巴成势妇科工作者 的当务之急。 近年来对富颈癌的瘸因研究及治疗己深入至基因水平，尤其 是目前欧美、爵本等国家的科学家对环氧会酶COX(Cyclooxygen— a,se，cox)基溜的结构、功能及每蒡孛瘤的关系作了大量衙究。 COX是花生舀烯酸转变秀前列腺素过程中的荧镶酶，其诱导型同 工酶COX一2鼓认为与肿瘤的发生密鞠辐关。研究发现在胃癌、 前列腺癌、膀硫肿瘸、肺菲小细胞癌及腺癌、结壹扬癌等多种肿瘤 稍缅脆系中COX一2表达升离。因此认为，COX一2的避高表达 与肿瘤的发生、发展密切楣关。有关COX一2mRNA在宫颈癌及 elN疆缓织中的表达情况尚不清楚升本研究应焉半定量RT～PCR mRNA表达水平，以 方法检测宫颈癌及CIN硪组织中的COX一2 鹋确其与宫颈瘫发生、发展的关系，为寻找宫颈癌早期基因诊断指 标以及基因治疗方法提供依据。 厂 实验材料 f 《 一、标本与来源 收集中国医科大学第一、第二临床学院2000年3月～2002年 10月手术切除或官颈活检并经病理学检查证实的70例新鲜组织 标本。宫颈癌30例，宫颈CINlN及原位癌lO例，慢性宫颈炎组织 30例。标本送于一70℃的冰箱中保存待测。 二、方法 90。 2．逆转录合成eDNA：在20止反应体系中分别加入样本RNA 1山以90℃孵育3min，42℃30min合成eDNA。 3．PCR扩增和产物分析：在PCR反应体系中将eDNA产物及 性，进行35个循环后，72℃10rain延伸。另一反应体系中同时扩 增B—aetin作为内对照。将PCR扩增产物用2％琼脂糖凝胶电泳 检测，溴乙锭染色分析，紫外灯下拍照，电泳凝胶成像及自动分析 IIDNA 系统摄像、并检测各扩增带的产物含量。中X174一Hinc Marker为分子量标准。每次实验均设阳性及空白对照。 对照690bp条带显示者判断为阳性，仅有内对照690bp条带显示 者判断为阴性。用内对照吸光度值标化COX一2吸光度值，得到 COX一2的相对含量，具体计算公式如下：COX一2相对含量= (COX一2韬手度／B—actin)×100； 5．统计学处理：采用SPSSl0．0软件进行统计学处理。实验 ·2· 数据用均数±标准差(X4-S)表示，两样本均数比较用t检验，两 样本率的比较采用x2检验或Fisher’s精确概率法。 实验结果 一、COX一2 mRNA在宫颈癌、宫颈CINⅢ及原位癌和慢性宫 颈炎组织中的表达 COX一2 mRNA在宫颈癌中的表达率和相对含量明显高于宫 颈CINⅢ及原位癌和慢性宫颈炎组织，经比较差异非常显著(P 0．01)。COX一2mRNA在宫颈CINⅢ及原位癌和慢性宫颈炎组织 中的表达率及相对含量比较均无明显差异(PO．05)。 二、COX一2mRNA表达与宫颈癌临床分期、病理分级及淋巴 结转移的关系 临床分期I、II、IⅡ及Ⅳ期宫颈癌COX一2raRNA的表达率和 相对含量经比较差异均无显著性(P0．05)。病理分级I级、Ⅱ 级及Ⅲ级宫颈癌中，COX一2mRNA的表达率和