多糖类药物研究概况.pdfVIP

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中囤药师 2002年第5卷第4期 233 ·综述与专论· 多糖类药物的研究概况 李亚芳 张晓华 (杭州市第一人民医院杭州310006) 美t词;糖奏药物 中圈分类号:R979.5文慧标识码:A 文章编号:1008—049Xf2002)04—0233—03 多糖是由糖苷键连接起来的醛糖或酮糖组成的 人参多糖川、灵芝多糖、附子多糖、白术多糖、山 天然分子,几乎存在于所有的有机体中,包括动 药多糖等【41。 物、植物、微生物(细菌和真菌)及海藻。由于多糖 1.2.3纤维素阴离子交换剂柱色谱法常见的交 具有广泛的生理活性,其研究日益增多。本文将从 换剂为DEAE一纤维素和ECTEOLA-纤维素,分为 提取分离纯化、含量测定、结构分析、生理活性四 硼砂型和碱型两种。洗脱剂可用不同浓度碱溶液、 个方面逐一简述。 硼砂溶液、盐溶液,其优点为吸附杂质、纯化多糖, 1提取分离纯化 并且适用于分离各种酸性多糖、中性多糖和粘多 1.1提取分离 糖。如北沙参总多糖分离得4个多糖组分_5l。太子 动植物多糖及微生物细胞内多糖的组织细胞多 参多糖分离得2种均一糖。6J。 有脂质包围,一般先粉碎原料,加入甲醇或1:l的 1.2,4 纤维素柱色谱纤维索柱先用乙醇平衡, 乙醇乙醚混合溶液或石油醚进行脱脂。含色素较高 加多糖混合于柱顶,按浓度由高至低的乙醇洗脱。 的根、茎、叶、果实类,需进行脱色处理。动物中所 分离酸性粘多糖采用硅藻土与磷酸钙的柱色谱。 含多糖多为酸性多糖,主要存在于动物的结缔组织 1.25其他方法 制备性区域电泳、超滤法、亲 中,常与蛋白质结合,常用碱溶液提取法、中性盐 和色谱、制备性高压液相色谱、活性碳柱色谱、 溶液提取法和蛋白酶水解法。其中以酶解法为最 LKB柱色谱系统l”。 好,具有产物降解少且产量高等优点。如鹿茸中酸 2含量测定 性多糖的提取采用木瓜酶消化法…。 2.1显色试剂一硫酸法 1.2分离纯化 根据单糖、多糖及其衍生物在硫酸作用下水 纯化是将多糖的混合物分离为单一的多糖。 解、脱水生成糖醛类化合物,与酚类、芳胺类等缩 1.2.1 沉淀法 包括分步沉淀法,如安络小皮伞 合成有色化合物。苯酚一硫酸法生成橙黄色溶液,在 租多糖的纯化方法旧』,在多糖溶液中加入不同浓度 490nm处有特征吸收。例如沙参多糖…8、枸杞子多 乙醇溶液,得多个多糖;盐析法(常用的盐析剂有 糖【9』、石斛多糖【loo等;蒽酮一硫酸法生成亮绿色溶 氯化钠、氯化钾、硫酸铵等);金属络合物法(常用 液在630nm处有特征吸收,其蒽酮试剂需新鲜配 的络合剂有菲林溶液、氯化铜、氢氧化钡、醋酸 制,如麦冬多糖¨¨、猪苓多糖等;咔唑一硫酸法用 铅);季铵盐沉淀法,根据长链季铵盐能与酸性多 于测定糠醛酸,如银耳多糖112J。显色试剂一硫酸法 糖成盐形成水不溶性多糖化合物的特性分离酸性多 简单方便,最为常用,但需严格控制水解条件,否 糖及中性多糖,如人参茎叶粗多糖经反复沉淀、透 则误差较大。 析、离心和脱脂后,以十六烷基溴化铵分级沉淀, 2 2 DNS法 每个样品分别得到酸性糖、弱酸性糖和中性糖部分 其利用3,5-二硝基水杨酸与多糖水解产物还 原糖共热后还原成棕红色氨基化合物,于540nm I.22 凝胶柱色谱法 其选用葡聚糖凝胶 处有特征吸收,如云芝肝泰多糖Ll…。 2.3鲎试剂法1141 (sephadex或sepharcee

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