玉米内生芽胞杆菌抗菌活性物质及其拮抗玉米大斑病菌机理初步与研究.pdfVIP

农 业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2012, 20(9): 1018~1027 DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2012.09.005 孢子捕捉器/ 研究报告 Letter 玉米内生芽胞杆菌的抗菌活性物质及其拮抗玉米大斑病菌机理的 初步研究 * * ** ** 候美玲 辛媛媛 郝志敏 曹志艳 申珅 张韶茹 董金皋 河北农业大学国家玉米产业技术研发中心/ 农业部真菌毒素与植物分子病理学实验室，保定071001 * 同等贡献作者 ** 通讯作者，dongjingao@126.com ；hzm_0322@163.com 摘 要 为了研究生防菌株对玉米大斑病菌的抑菌作用，深化对生防菌抗菌机制的认识，本研究从玉米 (Zea mays)植株体内分离拮抗玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica) 的内生细菌，对其抗菌物质及其抑菌机理 进行初步研究。结果表明，所分离的内生菌株YY1 经形态学观察、生理生化测定及16S rDNA 序列分析， 鉴定为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis) 。菌株YY1 发酵液的硫酸铵沉淀物具有抑菌活性，且在硫酸铵50% 饱和度时抑菌活性最强，说明YY1 菌株产生的抗菌活性物质可能是蛋白类物质。该菌株及其蛋白粗提液 均对禾谷镰刀菌 (Fusarium graminearum)、苹果轮纹病菌 (Botryosphaeria dothidea)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)、玉米弯孢霉叶斑病菌(Curvularia lunata)等7 种植物病原真菌有较强的拮抗作用。用蛋白粗提液 处理菌丝、分生孢子、原生质体后经显微观察发现，大斑病菌的基内菌丝由丝状畸变为串珠状，当蛋白粗 提液浓度为0.78 μg/μL 时，可完全抑制分生孢子萌发，并导致原生质体裂解。通过抑制孢子萌发过程中 信号途径相关基因的半定量RT-PCR 分析和玉米大斑病菌不同信号途径相关基因突变体的抑制率统计， 初步判定该抑菌过程主要通过cAMP 信号转导途径发挥作用。本研究为寻找玉米大斑病菌新的防治方法 和途径提供基础资料。 关键词 内生细菌，玉米大斑病菌，抗菌活性物质，信号途径 Antifungal Activity Substance of Endogeny Bacillus in Maize (Zea mays) and Mechanisms against Setosphaeria turcica HOU Mei-Ling* XIN Yuan-Yuan* HAO Zhi-Min** CAO Zhi-Yan SHEN Shen ZHANG Shao-Ru DONG Jin-Gao** The National Maize Industry Technology RD Center, Ministry of Agriculture/ Mycotoxin and Molecular Plant Pathology Laboratory, Agricultural University of Hebei, Baoding 071001, China * The authors who contribute equally ** Corresponding authors, dongjingao@126.com; hzm_0322@163.com Abstract In order to study the fungistasis and antifungal mechanisms of biocontrol strain against Setosphaeria turcica, one endophytic bacterium strain YY1 was isolated from leaves of healthy maize (Zea mays) plants and w